重组人VEGF165蛋白在毕赤酵母中高效表达与多克隆抗体的制备王晓12黄晓平12周宇12刁勇收稿日期：通信：刁勇(1967年)男教授主要从事新药研发基因药物研究.E-mail: 基金项目：国家自然基金 (No. 81271691)国际科技合作项目 (No. 2011DFG33320)福建省科技重大项目 (No. 2013N5007)华侨大学校级基金 (No. 11HZR19) 资助2(1

单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级第5章 基因工程菌的发酵大量的药用蛋白质是通过基因工程菌发酵产生的如生长因子酶激素抗体等基因工程菌表达蛋白质的目的：基因工程菌表达蛋白质有两个目的：目的一：目标产物是蛋白质故要设法提高发酵液中该蛋白质的含量提高体积生产速率目的二：外源基因所表达的产物是酶等代谢调控的成分外源基因的表达适度为宜不宜过分表达否则要引起宿主细胞代谢的

毕赤酵母表达实验手册大肠杆菌表达系统最突出的优点是工艺简单产量高生产成本低然而许多蛋白质在翻译后需经过翻译后的修饰加工如磷酸化糖基化酰胺化及蛋白酶水解等过程才能转化成活性形式大肠杆菌缺少上述加工机制不适合用于表达结构复杂的蛋白质另外蛋白质的活性还依赖于形成正确的二硫键并折叠成高级结构在大肠杆菌中表达的蛋白质往往不能进行正确的折叠是以包含体状态存在包含体的形成虽然简化了产物的纯化但不利于产物的

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原核表达 将克隆化基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达这种方法在蛋白纯化定位及功能分析等方面都有应用大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下特点：易于生长和控制用于细菌培养的材料不及哺乳动物细胞系统的材料昂贵有各种各样的大肠杆菌菌株及与之匹配的具各种特性的质粒可供选择但是在大肠杆菌中表达的蛋白由于缺少修饰和糖基化磷酸化等翻译后加工常形成包涵体而影响表达蛋白的生

单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级生态系统的结构单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级小飞守角制作基因指导蛋白质的合成DNA分子是怎样控制遗传性状的现代遗传学认为：生物的性状是由 控制的性状是由 物质体现的基因蛋白质DNA(基因)蛋白质(性状)基因如何指导蛋白质的合成遗传信息的转录遗传信息的翻译问题１：D