革兰氏染色法的过程及其在细菌分类方面的作用染色技术 由于微生物细胞含有大量水分(一般在80-90以上)对光线的吸收和反射与水溶液的差别不大与周围背景没有明显的明暗差所以除了观察活体微生物细胞的运动性和直接计算菌数外绝大多数情况下都必须经过染色后才能在显微镜下进行观察但是任何一项技术都不是完美无缺的染色后的微生物标本是死的在染色过程中微生物的形态与结构均会发生一些变化不能完全代表其生活细胞
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级实验二 细菌革兰氏染色法及细菌形态和特殊结构特征一目的要求 掌握革兰氏染色的技术了解革兰氏染色的原理及其在细菌分类学上的意义掌握芽孢荚膜和鞭毛染色技术了解芽孢荚膜和鞭毛染色的原理二基本原理 革兰氏染色法是一种鉴别性的染色方法基本步骤为先用初染剂结晶紫进行染色再用碘液媒染然后用乙醇(或丙酮)脱色最后用
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级实验技术四 革兰氏染色法 一实验目的 学习并初步掌握革兰氏染色法了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分 类鉴定中的重要性二基本原理 革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C.Gram创立的用革兰氏染色法不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类:G—— 菌体反应呈深紫色G-——菌体反应呈红色二基本原理
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级实验四 革兰氏染色法目的要求学习并掌握革兰氏染色法了解革兰氏染色原理巩固显微镜的使用方法及无菌操作技术菌种参考菌:金黄色葡萄球菌(G) 大肠杆菌 (G-)待测菌:蜡样芽孢杆菌蓝细菌(微囊藻)仪器 显微镜材料 载玻片香柏油二甲苯擦镜纸吸水纸染色缸等试剂 草酸铵结晶紫染色液卢戈氏碘液95乙醇0.5番红染色液制片初染媒染脱色
微生物染色液配制及染色法2.1 美蓝染色法2.1.1 吕氏碱性美蓝染色液美蓝 0.3g95乙醇 30mL0.01氢氧化钾溶液 100mL将美蓝溶解于乙醇中然后与氢氧化钾溶液混合2.1.2 染色法将涂片在火焰上固定待冷滴加染液染13min水洗待干镜检2.1.3 结果菌体呈蓝色2.2 革兰氏染色法2.2.1 结晶紫染色液结晶紫 1g95乙醇 20mL1草酸铵水溶液 80mL将结晶紫溶解于乙醇中然