实验二、叶绿体的分离及荧光现象观察 实验意义与目的叶绿体是植物细胞所特有的能量转换细胞器,是光合作用的重要场所,?由于具有这一重要功能,所以叶绿体一直是细胞生物学、遗传学和分子生物学的重要研究对象。 一、通过植物细胞叶绿体的分离,了解细胞器分离的一般原理和方法。二、观察叶绿体的自发荧光和次生荧光,并熟悉荧光显微镜的使用方法。 细胞器是细胞质中具有一定结构和功能的微结构,在细胞生命活动中扮演着重
细胞被搅拌器劈碎或受剪切力而破碎便宜细胞壁或细胞膜被消化使细胞破碎便宜B等密度梯度离心流程图依赖于样品颗粒的不同密度来进行离心分离的 离心后区带形成位置蔗糖甘油800-1000g ×10min80000g×100min100000g×60min图:各种细胞器大分子和病毒的密度及相应的沉降系数为了便于进行转速和相对离心力之间的换算人们在此公式的基础上制作了离心力的列线图见图2. 先在离心机半径标尺
实验二叶绿体的分离与荧光观察 细胞生物学实验实验目的1通过植物细胞叶绿体的分离,了解细胞器分离的一般原理和方法。2观察叶绿体的自发荧光和次生荧光,并熟悉荧光显微镜的使用方法。实验原理细胞器分离的过程包括两个主要阶段:破碎细胞和细胞组分的分离在等渗溶液中进行组织匀浆、分离叶绿体的分离采用差速离心或密度梯度离心法进行利用荧光显微镜观察叶绿体的自发荧光和间接荧光(次生/诱发荧光)常用的细胞破碎方法离心分
实验十五 叶绿体的分离与荧光观察(选做综合性实验6学时)实验目的通过植物细胞叶绿体的分离了解细胞器分离的一般原理和方法观察叶绿体的自发荧光和次生荧光熟悉荧光显微镜的使用方法实验原理将组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行差速离心是分离细胞器的常用方法叶绿体的分离应在等渗溶液( NaCl或 蔗糖溶液)中进行以免渗透压的改变使叶绿体受到损伤.将匀浆液在1000rmin的条件下离心2 min以除去其中的组织残渣
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级实验二 叶绿体的分离与观察和细胞大小的测量 一. 实验原理 1.组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行差速离心是分离细胞器的常用方法一个颗粒在离心场中的沉降速率取决于颗粒的大小形状和密度也同离心力以及悬浮介质的粘度有关在一给定的离心场中同一时间内密度和大小不同的颗粒其沉降速率不同依次增加离心力和离心时间就能够使非均一悬浮液中
实验材料和用具
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级实验六 细胞核和线粒体的荧光观察一实验目的学习荧光显微镜的工作原理及使用方法了解荧光探针Rhodamine 123 和Hoechst33342 与细胞成分的结合特性和光谱特性二实验原理1.荧光显微镜 细胞参量荧光探针 吸收发射 nm特性DNA和RNAPropidum iodide(PI) 535617 红色荧光
1了解细胞器分离的一般原理与方法2掌握分级分离的原理和注意事项3观察叶绿体的自发荧光和次生荧光4熟悉线粒体的分离方法以及詹纳斯绿B 超活染色的方法1)取上一实验步骤5中获得的上清夜装入干净的离心管中在高速冷冻条件下10000 rmin 离心10 min 沉淀即为线粒体2)留适量溶液将沉淀悬浮即用 M NaCl溶液3)取一滴悬浮液于载玻上用一滴1詹纳斯绿B染液染色时间为5-10 mi
实验二密度梯度离心法分离叶绿体上海交大生命学院2015年10月一、学习目标学习破碎组织、细胞的技术方法。了解细胞分离技术的方法原理。熟悉低温高速离心机的使用方法。掌握叶绿体的快速分离法。二、实验仪器、材料与试剂? 每人: 复式双筒显微镜(带油镜)、Motic数码互动系统每组常备:擦镜纸/盖玻片;载玻片/镊子;记号笔;小片滤纸;移液器/吸头;香柏油/二甲苯;15和5ml离心管(如缺少可至准备处
收集:许一帆、法伊提、王惟佳ppt制作:周笑笑 讲演: 石洛溪、刘翔宇 叶绿体的分离与观察Part1 细胞破碎技术细胞破碎技术指利用外力破坏细胞膜和细胞壁,使细胞内容物包括目的产物成分释放出来的技术,是分离纯化细胞内成分的基础。方法:机械法、非机械法细胞破碎阻力细菌肽聚糖的网状结构酵母菌细胞壁结构交联的紧密程度;细胞壁的厚度真菌葡聚糖、几丁质以及糖蛋白聚合物的网状结构;几丁质或纤维素的纤维状结
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