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  增加PCR的特异性： 1. primers design 这是最重要的一步理想的只同目的序列两侧的单一序列而非其它序列退火的primer要符合下面的 一些条件 a. 足够长18-24bp以保证特异性.当然不是说越长越好太长的primer同样会降低特异性并且降低产量 b. GC 4060 c. 5端和中间序列要多GC以增加稳定性 d. 避免3端GC rich 最后3个BASE不要有GC或者最后5个有

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