单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级PCR技术简介PCR技术简介-定义 PCR: polymerase chain reaction 聚合酶链式反应 PCR技术是一种体外模拟自然DNA复制过程的核酸扩增技术亦称为无细胞分子克隆技术它是以待扩增的两条DNA链为模板在一对人工合成的寡核苷酸引物的介导下通过耐高温D
单胺氧化酶犬尿氨酸羧化酶 谷氨酸脱氢酶柠檬酸循环酶系(FMN)捕光色素叶绿体外被一G蛋白的结构与活性变化配体-受体复合物 GDP GDPPi受体激活的G蛋白G蛋白可调节K通道的开放从而参与心率的调节Gs蛋白调节K通道开关的机制图解第3节 G蛋白关联受体与G蛋白?亚基水解GTP为GDPPi2细胞内的钙信号肾上腺素(肾上腺髓质)①引起糖原降解应付细胞对能量的急需??亚基激活的G蛋白?亚基激活的磷酸化酶
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マスタ タイトルの書式設定1The Unusual Origin of the Polymerase Chain Reaction (Scientific American 1990262(4):56-61 64-5 )Primer-directed Enzymatic Amplification of DNA with a Thermostable DNA Polymerase (Science
常规PCR体系配制与程序设置543子链延伸DNA加倍已知序列4)LP-PCR(Labelled primers) 原位聚合酶链式反应(In Still PCRIs-PCR)是由Haase等于1990年首创它是利用完整的细胞作为一个微小的反应体系来扩增细胞内的目的片段在不破坏细胞的前提下利用一些特定的检测手段来检测细胞内的扩增产物 直接用细胞涂片或石蜡包埋组织切片在单个细胞中进行PCR扩增
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PCR和RT-PCR技术PCR基础聚合酶链式反应(PCR)过程利用模板变性引物退火和引物延长的多个循环来扩增DNA序列这是一个指数增长的过程因为上一轮的扩增产物又作为下一轮扩增的模板使其成为检测核酸的一种非常灵敏的技术一般经过20-30个循环得到的扩增产物就足够在溴化乙锭染色的凝胶上观察到反应包括几个成分(表1)模板可以为纯化的基因组或质粒DNA由RNA转化得到的cDNA或未经纯化的粗制生物样品如
(一)仪器设备??? 英国Thermo Hybaid原位PCR仪 ??? (二)操作流程 ???? 1原位PCR步骤???? 1)预处理:???? (1)切片常规脱蜡???? (2) HCl处理10min???? (3)5μgml蛋白酶K消化组织37℃10min???? (4)Nase消化组织37℃ 30min???? (5)梯度酒精脱水室温干燥???? 2)原位扩增:???? (1)切片滴加特异
单击此处编辑标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级聚合酶链反应及相关技术 聚合酶链反应(PCR:Polymerase Chain Reaction)Polymerase: DNA聚合酶 PCR技术的创建Kary B. Mullis(穆利斯(美))Khorana(1971)等提出在体外经DNA变性与适当引物杂交再用DNA聚合酶延伸克隆DNA的设想 1983年Mu
单击此处编辑标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级PCR技术及其应用分子生物学与临床 中 山 大 学 主讲:杨 中 汉(yangzhonghan163)目 录PCR的概念 PCR技术的创建PCR的原理PCR的反应体系和方法PCR的类型和应用 多聚酶链式反应(PCR:Polymerase Chain Reaction)Polymerase: D
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