重组质粒的构建、转化、筛选和鉴定实验目的:1 学习在实现DNA体外重组过程中,正确选择合适的载体和限制性内切酶并能对限制性核酸内切酶对载体和目的DNA进行切割,产生利于连接的合适末端。2 学习设计构建重组DNA分子的基本方法,掌握载体和外源目的DNA酶切的操作。3 学习利用T4DNA连接酶把酶切后的载体片段和外源目的DNA片段连接起来,构建体外DNA分子的技术,了解并掌握几种常用的连接方式。4
质粒DNA及λDNA的酶切连接转化及重组子的筛选鉴定陈倩倩 交流生 118627140313一实验目的:1学习和掌握限制性内切酶的特性2掌握对重组质粒进行限制性内切酶酶切的原理和方法3掌握利用CaCl2制备感受态细胞的方法4学习和掌握热击法转化的原理和方法5掌握α互补筛选法的原理6学习用试剂盒提取重组质粒DNA的方法7复习琼脂糖凝胶电泳的原理及方法二实验原理:重组质粒的构建需要对DNA分子进行
重组质粒的连接、转化及筛选概述 质粒具有稳定可靠和操作简便的优点。如果要克隆较小的DNA片段(<10kb)且结构简单,质粒要比其它任何 载体都要好。在质粒 载体上进行克隆,从原理上说是很简单的,先用限制性内切酶切割质粒DNA和目的DNA片段, 然后体外使两者相连接, 再用所得到重组质粒转化细菌,即可完成。但在实际工作中, 如何区分插入有外源DNA的重组质粒和无插入而自身环化的
重组质粒的连接、转化及筛选概述 质粒具有稳定可靠和操作简便的优点。如果要克隆较小的DNA片段(<10kb)且结构简单,质粒要比其它任何 载体都要好。在质粒 载体上进行克隆,从原理上说是很简单的,先用限制性内切酶切割质粒DNA和目的DNA片段, 然后体外使两者相连接, 再用所得到重组质粒转化细菌,即可完成。但在实际工作中, 如何区分插入有外源DNA的重组质粒和无插入而自身环化的
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级第十章 重组DNA的构建筛选及鉴定分析1. 重组DNA导入宿主细胞2. 重组子的筛选3. 阳性重组子的验证与分析一 目的基因的获取5 MNAAAAAAAAAAAA(A)n 3Poly(A) RNA5 T12MN 3锚定引物逆转录5 MNAAAAAAAAAAAA(A)n 33M N TTTTTTTTTTTT 5变性
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级实验五 转化及重组子的筛选 实验目的2. 实验原理3. 实验仪器材料与试剂4. 实验步骤 5. 实验结果与讨论实验目的了解细胞转化的概念及其在分子生物学研究中的意义学习外源DNA转化入受体菌细胞并筛选转化子的方法 实验原理转化(transformation
#
重组质粒的构建关键词: 重组质粒??? 构建?????????????????????????????????????????????? 重组质粒构建是常用的分子生物学手段其实只是最基本的方法一般一个星期同时构建三二个组质粒是没有问题的在国内先进的实验中也大都是由实验员搞定但是其中还是有些基本的技巧需要掌握在这里将我的心得分享于大家这也是我本人几年来一线工作时的经验积累以期能为谷友提供借鉴让大家在
Click to edit Master title styleClick to edit Master text stylesSecond levelThird levelFourth levelFifth level第89章 基因文库的构建和鉴定筛选 Gene libraries cDNA libraries Library screening一基因文库的概念1基因文库(gene libra
hTERT shRNA表达质粒的构建及鉴定胡凡果1史玉荣2牛瑞芳2刘彤1只向成3(1 天津医科大学总医院普通外科 3000002天津医科大学附属肿瘤医院中心实验室3000003天津医科大学附属肿瘤医院乳腺三科 300000)通讯:只向成 [摘要] 目的 构建针对人端粒酶催化亚基hTERT的shRNA表达质粒并加以鉴定 方法 以具有G418抗性的pBAsi-hU6-Neo(BamHI
违法有害信息,请在下方选择原因提交举报