International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine (IFCC)Scientific Divisiomittee on Reference Systems for Enzymes (C-RSE)IFCC Primary Reference Procedures for the Measureme
项 目碱性磷酸酶(ALP)方 法SFBC速率法目 录1. 检测原理2. 标本采集与处理 受检者的准备 静脉采血 抗凝剂 标本处理3. 试剂 试剂 校准血清 试剂校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能 精密度 准确度 灵敏度 可报告范围 特异性 干扰8. 参考值9. 临床意义附录A: 参数1. 检测原理无色的对硝基苯磷酸二钠在碱性磷酸酶的作用下生成在405nm处有特异吸收的淡黄
碱性磷酸酶 碱性磷酸酶( ALP 或 AKP )是广泛分布于人体肝脏骨骼肠肾和胎盘等组织经肝脏向胆外排出的一种酶这种酶能催化核酸分子脱掉5磷酸基团从而使DNA或RNA片段的5-P末端转换成5-OH末端但它不是单一的酶而是一组同功酶目前已发现有 AKP1 AKP2 AKP3 AKP4 AKP5 与 AKP6 六种同功酶其中第 1 2 6 种均来自肝脏第 3 种来自骨细胞第 4 种产生于
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酶促反应模式——中间产物学说Km[S] Km1V 1[S] 酶浓度对反应速度的影响 低温的应用最适pH (optimum pH):酶催化活性最大时的环境pH碱性磷酸酶[s]
1.了解底物浓度对酶促反应速度的影响2.了解米孟方程Km值的物理意义及双倒数作图求Km的方法当反应速度为最大反应速度一半时V(林-贝氏方程)
血清碱性磷酸酶活性测定磷酸苯二钠法小组成员:程展鹏,杨秋月,陈敬根,卢昆实验目的熟悉酶活性测定方法的一般原理掌握血清ALP测定原理与临床意义实验原理在PH10 环境中,ALP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠,苯酚与4-氨基安替比林反应生成色素原,该色素原经铁氰化钾氧化生成红色醌亚衍生物。测定红色物质的吸光度就可以计算酶活性的大小。反应式如下:ALP磷酸苯二钠+H2O苯酚+磷酸氢二钠 pH1
中性粒细胞碱性磷酸酶染色NAP主要存在于成熟阶段的粒细胞胞浆中结果以阳性率和积分值表示正常人阳性细胞平均为2040以十阳性反应为主阳性积分值<70【异常结果分析】活性增高:可见于细菌性感染类白血病反应再生障碍性贫血急性淋巴细胞白血病慢性粒细胞白血病急变时多发性骨髓瘤神经母细胞瘤垂体一肾上腺皮质激素功能亢进妊娠23个月后活性减低:可见于急慢性粒细胞白血病绿色瘤红白血病阵发性睡眠性血红蛋白尿病毒感染等
各 H2O (mL)
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