Click to edit Master title styleClick to edit Master text stylesSecond levelThird levelFourth levelFifth level高效液相色谱法原理与应用参考书《高效液相色谱及其应用》《液相色谱检测方法》《实用高效液相色谱法的建立》1第1章 色谱基本原理一色谱法概述色谱法的定义与特点色谱法的分离原理色谱法的
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单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级 高效液相色谱法 及其应用 赵建军高效液相色谱法 基本概念 分离原理 系统结构 分析方法
(通常用的最多的是第二种即分配平衡)色谱分离原理 高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法液液分配色谱法(正相与反相)离子交换色谱法离子对色谱法及分子排阻色谱法 1.液固色谱法 使用固体吸附剂被分离组分在色谱柱上分离原理是根据固定相对组分吸附力大小不同而分离分离过程是一个吸附-解吸附的平衡过程常用的吸附剂为硅胶或氧化铝粒度510μm适用于分离分子量2001000的组分大多数用于非离子型化合
检测器低可以敏感A2S1 S2 由于2-甲基丁基-14-二醇不仅缺乏必要的吸收基团而且不能在OB柱拆分应采用苯甲酰氯将其衍生为2-甲基丁基-14-二醇二苯甲酸酯后才能进行分离测定 蒸发光散射质量检测器(Evaporative Light-Scatting Mass Detector ELSD)蒸发流动相S 在硅胶吸附色谱中 对相对保留值和分离选择性起主导作用的是溶质与固定相的作用 流动
高效液相色谱法的主要类型与原理(一)正相键合相色谱法 固定相的极性大于流动相的极性 固定相-氨丙基氰丙基 流动相-以正己烷为底剂加入极性调节剂2.流动相的极性与保留因子的关系 极性强的组分的保留因子k 小先洗脱出柱流动相的极性增强洗脱能力减弱使组分 k 增大tR 增大反之k 减小 tR 减小1.分离机制 以RPIC分离碱类物质为例用离子对模式说明
吸附色谱库仑力蛋白酶抗体分离生物和医药分析2进样系统通常采用六通伐进样:3色谱柱(1)紫外-可见检测器荧光检测器结构示意图键合固定相非极性键合固定相: 键合在载体表面的功能分子是烷基苯基等非极性有机分子如最常用的ODS(Octa Decyltrichloro Silane)柱或C18柱就是最典型的代表其极性很小极性键合固定相: 键合在载体表面的功能分子是具有二醇基醚基氰基氨基等极性基团的有机分子
高 效 液 相 色 谱我国药典收载高效液相色谱法项目和数量比较表:方法项目数量1985年版1990年版1995年版2000年版HPLC法鉴别934150检查1240160含量测定760117387鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC TOC o 1-3 h z u HYPERLINK l _Toc145648959 I.概论 PAGER
第十八章 高效液相色谱法High performance liquid chromatography;HPLC固定相刚性固体或硬胶流动相液体(有机溶剂或水等)分离机制液液分配色谱、液固吸附色谱、离子交换色谱、尺寸排阻色谱与亲和色谱高效液相色谱法高效液相色谱法与经典液相色谱法高压输液泵输送流动相,流速快,分析速度快颗粒极细(一般为10?m以下)、规则均匀的固定相,传质阻抗小,柱效高,分离效率
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