相关文档

• 克隆载体与表达载体-v2.docx

  克隆载体：大多是高拷贝的载体，一般是原核细菌，将需要克隆的基因与克隆载体的质粒相连接，再导入原核细菌内，质粒会在原核细菌内大量复制，形成大量的基因克隆，被克隆的基因不一定会表达，但一定被大量复制。克隆载体只是为了保存基因片段，这样细胞内不会有很多表达的蛋白质而影响别的工作。?????? 克隆载体(Cloning vector )：携带插入外源片段的质粒或噬菌体，从而产生更多物质或蛋白质产物。(这

• t载体克隆.doc

  （一）重组T质粒的构建一．原理外源DNA与载体分子的连接就是DNA重组这样重新组合的DNA叫做重组体或重组子重组的DNA分子是在DNA连接酶的作用下有Mg2 ATP存在的连接缓冲系统中将分别经酶切的载体分子与外源DNA分子进行连接DNA连接酶有两种：T4噬菌体DNA连接酶和大肠杆菌DNA连接酶两种DNA连接酶都有将两个带有相同粘性末端的DNA分子连在一起的功能而且T4噬菌体DNA连接酶还有一种大肠

• siRNA表达载体的构建_-V2.docx

  siRNA表达载体的构建siRNA表达载体构建可以：（1）作为后基因组时代基因功能分析的有力工具；（2）应用于基因组学、细胞信号传导通路分析；（3）用于药物靶点筛选、疾病治疗。实验方法原理:多数的siRNA表达载体依赖三种RNA聚合酶III 启动子(pol III)中的一种，操纵一段小的发夹RNA(short hairpinRNA, shRNA)在哺乳动物细胞中的表达。这三类启动子包括大家熟悉的

• 第3章基因克隆载体(1质粒载体)-part.ppt

  单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级第三章 基因克隆载体(质粒载体)Review载体应具备的条件(P38) 1. 具有针对受体细胞的亲缘性或亲和性(可转移性)2. 具有与特定受体细胞相适应的复制位点或整合位点3. 具有多种单一的酶切位点(多克隆位点)4. 具有合适的选择性标记 自我复制表达外源基因的插入不影响其功能的发挥易于从宿主细胞分离出来5. 分子量尽可能小

• 载体与表达系统.doc

  载体与表达系统0001--pIRES --BD Co--真核表达--yshu3507 0002--pECFP-C1--BD Co--真核表达--yshu3507 0003--pShuttle------victoh0004--pSBR322------chujun_hust0005--pcDNA3.1()CAT--invitrogen--真核表达--wangjun20022740006--p

• 分子克隆载体的选择.ppt

  4.?载体容量 M13mp载体 <4 kb 细菌质粒载体 <10kb λ载体 <23kb cos质粒载体 <48kb P1载体 <95 kb pYAC载体 ∽1000 kb 5.?合适的克隆位点 单克隆位点和多克隆位点

• 表达载体2014.ppt

  表达载体构建的一般原则1、阅读框架要使目的基因得以表达，最重要的因素是外源目的基因本身必须置于正确的阅读框架之中。用人工接头可以调节阅读框架，选择适当的人工接头，就可使外源基因处于正确的阅读框架中。2、启动子（关键因素）有效的转录起始是外源基因能否在宿主细胞中高效表达的关键步骤之一。因此，选择强的启动子及其相关的调控序列，是构建一个高效表达载体首先要考虑的问题。 3、转录的有效延伸和终止 外源基因

• LYM基因克隆构建PAbAi载体.doc

  = 1 \* ROMAN I 加样 酶(HS) 05ul前引物 1ul后引物 1ulHS(25)dNTP (25mM) 1ul 30s/1Kb buffer 5DNA 1ul灭菌水 165 ul 加完样后短暂离心后需将产物置于冰上数分钟后再放进PCR仪；点样时加5ul的marker，根据marker亮度来估算产物浓度。 II 目的片段回收，依据试剂盒说明书。最后一步用加热过的ddH2O溶解I

• 原核表达载体.doc

  原核表达体系的构建刘华彬董浚键一实验材料（1）植物材料：拟南芥（2）载体及菌株：克隆及测序用载体为pMD18-T购自Takara宿主菌DH5α原核表达载体（pET30c ）（3）PCR引物：登陆GeneBank查找目的基因序列以目的基因序列为模板设计引物（4）药品试剂：反转录试剂盒（TaKaRa）质粒小提试剂盒（TIANGEN）胶回收试剂盒Taq DNA聚合酶（TaKaRa）dNTPs（TaK

• 双元表达载体.doc

  双元表达载体与共整合载体(cointegrating vector) 相对binary vector 指转化由两个载体来完成相容vir基因在实现T-DNA转移过程中没有与T-DNA在同一质粒上小Ti质粒 含T-DNA区而缺少vir区的质粒比如pBIN19 pBI121带vir区的质粒 主要功能是利用vir基因的作用激活T-DNA 的转移比如常用农杆菌菌株LBA4404其中带有这种T-DNA