#
实验十 猪胰蛋白酶的纯化及其活性测定一、实验目的1 学习胰蛋白酶的纯化及其结晶的基本方法。2 学习用紫外法测定酶活性,搞清酶活性与比活性的概念。二、实验原理胰蛋白酶是以无活性的酶原形式存在于动物胰脏中,在Ca2+的存在下,被肠激酶或有活性的胰蛋白酶自身激活,从肽链N端 赖氨酸和异亮氨酸残基之间的肽键断开,失去一段六肽,分子构象发生一定改变后转变为有活性的胰蛋白酶。胰蛋白酶原的分子量约为24000,
#
蛋白酶活性的测定方法(GB/T23527-2009)1 原理 蛋白酶对酪蛋白、乳清蛋白、谷物蛋白等都有很好的水解作用。磷钨酸和磷钼酸混合试剂,即福林-酚试剂,碱性条件下极不稳定,易被酚类化合物还原而呈蓝色反应(钨兰和钨兰混合物)。由于蛋白质中含有具有酚基的氨基酸(酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸),因此,蛋白质及其水解产物也呈此反应。利用蛋白酶分解酪素(底物)生成含酚基氨基酸的呈色反应,来间接测定蛋白
大豆蛋白质的酶法改性及其在食品中的应用
氨基酸分离鉴定中显色剂为什么不能用茚三酮水溶液茚三酮根很多种氨基酸都显示紫色没办法分离鉴定呀茚三酮使氨基酸显色原理α氨基酸与茚三酮在弱酸性溶液中共热反应后经失水脱羧生成氨基茚三酮再与水合茚三酮反应生成紫红色最终为蓝色物质脯氨酸等仲胺氨基酸与茚三酮反应生成黄色物质该反应可广泛用于各种氨基酸的定性或定量测定 阿尔法氨基酸与水合茚三酮一起加热经氧化脱氨变成相应的阿尔法酮酸酮酸进一步脱羧变成醛水合茚三酮被
二实验原理管号酚试剂 (ml)三氯醋酸(ml)40℃水浴保温10分钟过滤得滤液 1胰酶活力定义: 40 ℃ 反应10min每分钟水解酪蛋白产生酪氨酸 1 微克为一个酶活力单位计算:1g 蛋白酶所具备的总活力单位为: ( A 样 - A 对)× K × Vt × N A 样 :样品液光吸收值 A 对 :对照液光吸收值 K :标准曲线上A680nm为 1 时
蛋白酶:催化蛋白质类化合物中肽键水解分解蛋白质生成胨腙多肽氨基酸的一类酶的总称存在:动物内脏 植物茎叶果实 微生物细胞不同种类的生物分泌蛋白酶的种类和性质不同因此利用外源蛋白质类物质的能力也不同胃蛋白酶()胃
蛋白酶定义1g固体酶粉(或1ml液体酶)在一定温度和pH值条件下1min水解酪素产生1μg酪氨酸为一个酶活力单位以ug(uml)表示福林法(第一法) 原理蛋白酶在一定温度与pH条件下水解酪素底物产生含有酚基的氨基酸(如:酪氨酸色氨酸等)在碱性条件将福林试剂(Folin)还原生成钼蓝与钨蓝用分光光度法测定计算其酶活力 试剂和溶液.1 福林试剂的制备于2000ml磨口回流装置中加入钨酸钠(Na2W
胰蛋白酶活性测定在动物胰脏中胰蛋白酶是以无活性的酶原状态存在的在生理条件下胰蛋白酶原随胰液分泌至十二指肠后在小肠上腔有Ca2的环境中为肠激酶或胰蛋白酶所激活其肽链?N?-端的赖氨酸与异亮氨酸之间的一个肽键被水解失去一个酸性6肽其分子构象发生一定的改变后转变为具有催化蛋白质水解活性的胰蛋白酶胰蛋白酶原分子量约为24?000其等电点为pH8.9胰蛋白酶的分子量约为23?400其等电点为pH?10
违法有害信息,请在下方选择原因提交举报