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  乳鼠肾细胞的原代培养生05边晔 2010030026周二班 同组同学：解智博实验时间 2012年11月12日实验背景细胞分离技术根据所取组织可分为：离心分离法（细胞外液环境）；机械分离法（如切割，挤压等）；化学分散法（如酶）；细胞表面抗原等。培养细胞的纯化自然纯化；人工纯化。人工纯化又包括酶消化法，反复贴壁法，机械刮除法，克隆法，培养基限定法，流式细胞仪等。细胞冻存与复苏基本原则：慢冻快融。实

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  原代培养细胞体外生存过程原代培养期 传代期 衰退期细胞分离技术离心分离法机械分离法化学分散法细胞表面抗原（电泳、流式细胞仪）等培养细胞的纯化自然纯化人工纯化酶消化法反复贴壁法机械刮除法克隆法培养基限定法流式细胞仪细胞冻存与复苏基本原则：慢冻快融冻存冻存保护剂：甘油、二甲基亚砜（DMSO）复苏37℃水浴中，30秒-1分钟，充分摇动使其急速融化。活性检测染色排除法MTT比色法乳鼠肾细胞的原代培养实验器

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  细胞生物学实验盛心磊 2009012337 乳鼠肾细胞的原代培养生92 盛心磊 2009012337同组成员：王璇实验时间：2012年4月19至4月26实验目的：学习、了解细胞原代培养的一般方法与步骤。掌握无菌操作技术。复习并再次练习细胞的传代培养技术。实验器材与试剂：1实验器材：超净工作台、倒置显微镜、二氧化碳培养箱、水浴锅、高压灭菌锅、离心机、滤器、酒精灯、酒精棉、镊子、器械缸、废液缸、记号笔

• 乳鼠心肌细胞分离培养.docx

  乳鼠心肌细胞及成纤维细胞的原代分离和培养备注：试剂用量为1只乳鼠所需用量D1：（次日开始培养的话，提前：17～21h）1提前准备①镊子2把，剪刀1把，皿3个，血清瓶2个（一个含转子），离心管1个等高压灭菌，烘干--------放饭盒内于烤箱内保存②提前30min照台（放入）：饭盒，1把1000μl枪，枪头，装有75%酒精的小烧杯，封口胶，纱布③同时把PBS从4度冰箱中放入37℃水浴箱。④通风10

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  原代细胞培养实验---小鼠胚胎成纤维细胞培养指导教师：费晓方2014年6月掌握无菌操作技术掌握组织细胞的消化与分散熟悉原代细胞培养的一般方法与步骤熟悉小鼠解剖操作技术实验目的和要求： 选择大约一半足孕时间的胚胎10－13天龄胚胎含有最大数量的未分化的间质细胞胚胎成纤维细胞可从这些细胞衍生获得 每组小鼠胚胎2-5个动物的选择：实验材料：每组的超净台中有以下物品：1. 50

• 乳鼠心肌细胞分离培养(1).docx

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  细胞传代方法：当细胞长满培养板80%-90%时，就要进行传代。实验前准备：紫外开20-30分钟，同时将DMEM培养基（红色）、PBS（白色）、胰酶、胎牛血清于37度水浴中加热（因为细胞最适生长环境是37度。）所有外面拿到操净台里面的东西都要喷酒精消毒。倒掉DMEM（细胞是贴壁生长的，所以还留在板上）用PBS洗3次1个10cm板加1ml的胰酶，于37度培养箱消化2-3min，（胰酶的最适温度是3