实验四 碱性磷酸酶米氏常数的测定一.实验目的1.通过碱性磷酸酶米氏常数的测定了解其测定方法及意义2.学会运用标准曲线测定酶的活性加深对酶促反应动力学的理解二.实验原理当温度pH及酶浓度恒定的条件下酶促反应的初速度随作用物浓度[S]增大而增大但增大到一定限度时作用物浓度再增加则反应速度不再增加此时反应速度为最大速度(Vmax)如图5-1所示图5-1Vm12VmKm[S]Michaelis Mente
?底物浓度对酶促反应速度的影响米氏常数的测定 目的要求(1)了解底物浓度对酶促反应的影响(2)掌握测定米氏常数Km的原理和方法实验原理 Km定义: Km值等于酶促反应速度达到最大反应速度一半时所对应的底物浓度。Km的意义Km是酶的特征常数之一,不同的酶Km值不同,同一种酶与不同底物反应Km值也不同。Km值可近似的反应酶与底物的亲和力大小: Km值大,表明亲和力小;Km值小,表明亲和力大。测定Km值
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四[操作步骤]1. 底物浓度对酶促反应速度的影响 (2)加入血清后各管混匀并且立即记录时间将上述各管置37℃水浴中准确保温15分钟 (3)保温结束立即加碱性溶液终止反应
蔗糖酶米氏常数的测定 【目的】:了解底物浓度与酶反应速度间的关系,学习求蔗糖酶米氏常数的方法【原理】:米氏方程式 v = Vmax[S]Km +[S]式中,Vmax为最大反应速度,Km为米氏常数。米氏常数的求法很多,最常用的是LineweaVerBurk的作图法(双倒数作图法)。将米氏方程式改写为下列倒数形式:1/V=Km/Vmax·1/[S]+1/Vmax实验时,选择不同的[s],测定相应的v,
掌握蛋白水解酶法测定血清K含量的原理和方法掌握血清K测定的临床意义能够独立正确规范地操作分光光度计能够对实验现象结果进行合理分析标准液400 μl
了解血清尿素氮测定的方法及临床意义复习尿素的生成机理及其意义 计算及结果分析思考题
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阿氏常数及定律专题1.在相同的温度和压强下4个容器中分别装有4种气体已知各容器中的气体和容器的容积分别是a. CO2100mLb. O2200mL400mL则4个容器中气体的质量由大到小的顺序是A.a>b>c>d B.b>a>d>cC.c>d>b>a D.d>c>a>b2.下列叙述正确的是A.同温同压下相同体积的物质它们的物质的量必相等B.任何条件下等物质的量的乙烯和一氧化
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