外源DNA和质粒载体的连接反应外源DNA片段和线状质粒载体的连接也就是在双链DNA5磷酸和相邻的3羟基之间 形成的新的共价链如质粒载体的两条链都带5磷酸可生成4个新的磷酸二酯链但如果质粒DNA已去磷酸化则吸能形成2个新的磷酸二酯链在这种情况下产生的两个杂交体分子带有2个单链切口当杂本导入感受态细胞后可被修复相邻的5磷酸和3羟基间磷酸二酯键的形成可在体外由两种不同的DNA连接酶催化这两种酶就是大肠杆
实验三 外源DNA片段在质粒载体中的克隆DNA重组技术包括载体及外源DNA片段的酶切消化目的片段的获得及纯化目的片段与克隆载体的体外连接重组子的筛选和鉴定等内容DNA片段的克隆技术是分子操作的核心部分实验目的:学习DNA的酶切纯化及外源片段与载体的连接将BAC克隆所携带的外源DNA酶切片段亚克隆到pUC18载体上实验材料:外源片段来自一个含有水稻DNA片段的BAC克隆的酶切片段克隆载体为P
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中 国 海 洋 大 学 实 验 报 告 2010 年 4月 26日晚上第9组 赵钰 专业年级 07级生命基地班 课程 分子生物学实验 题目 DNA片段的回收同组者 刘安 王梓华 040012007174 一:【实验目的】1:学习D
一)黏性末端DNA分子间的连接 在DNA片段上某一酶切口处换成另一种酶切口5 P-3 5突出的末端 外源片段先用Klenow补平然后用TdT补加polyC载体片段也用Klenow补平加polyG退火不经连接即可转化目的是:不使酶切位点遭受破坏 ployG退火用化学合成法合成的一段10-12bp的特定限制性内切酶识别位点序列的平端双链1978年康内尔大学的吴瑞教授发明Blunt-en
DNA聚合酶和DNA连接酶的比较比较项目DNA聚合酶DNA连接酶??不?同?点形成磷酸二酯键的方式只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核酸片段的3末端的羟基上形成磷酸二酯键是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键不是在单个脱氧核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键是否需要模板以一条DNA链为模板将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来因DNA连接酶不
DNA聚合酶和DNA连接酶的比较比较项目DNA聚合酶DNA连接酶??不?同?点形成磷酸二酯键的方式只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核酸片段的3末端的羟基上形成磷酸二酯键是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键不是在单个脱氧核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键是否需要模板以一条DNA链为模板将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来因DNA连接酶不需要模
第3章建立超级链接31超链接的建立 32超链接的应用 31超链接的建立 311超链接标签312在同一文件中建立链接313不同文件的链接 321链接其他站点322更改链接的颜色323用链接实现发信 32超链接的应用 311超链接标签文件中,建立超链接的标签为a和/a。1.格式:a href=链接位置target=窗口名称超链接名称/a2.说明:① 超链接名称就是链接的源点,当鼠标被移到超
I. 常用DNA载体 1. Lambda DNALambda DNA ismonly used as a substrate in restriction enzyme activity assays and for preparation of DNA molecular weight standards. The phage is isolated from a heat-induci
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级实验专题模块四 DNA的提取及特定DNA片段的鉴定质粒以及质粒DNA的提取质粒的酶切鉴定质粒的PCR鉴定在生命科学高度发展的今天蛋白质酶和核酸等生物大分子的结构与功能的研究是探求生命奥秘与疾病研究的中心课题生物大分子结构与功能的研究必须首先解决生物大分子的制备问题有能够达到足够纯度的生物大分子的制备工作为前题结构与功能的研究就
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