那么首先要有质粒然后才能转染所以第一步就是做质粒:然后继续分解:1.要对质粒有了解简单的说质粒是一个载体可以携带目的基因进入细胞2.你要携带什么基因根据你的描述你要携带的是干扰基因该基因能翻译成RNA后可以干扰你的目的蛋白翻译从而起到基因沉默的作用3.干扰基因的序列是什么这需要你自己查自己设计或者找设计3.一般的质粒是我们成为空载即没有携带目的基因那么问题就来了如何让空载带上干扰基因也就是
[精华]质粒DNA转染注意事项:聚焦转染专辑终结篇(中)【字体: l 大 l 中 l 小】 时间:2005年08月19日 来源:生物通-------------------------------------------------------------------------------------------------------------
NeonTM电转染一般流程电穿孔前一至两天将细胞转移至装有新鲜培养基的培养皿中保证实验当天细胞量达到70-90加培养基(不含抗生素)到24孔板中每孔500μl放于37℃培养箱预热(注:使用其他孔数培养板或者100μl枪头时加入培养基和质粒及细胞的数量见下表1)将培养细胞取出悬浮细胞直接取部分培养的细胞计数确定细胞密度贴壁细胞用2ml的PBS冲洗细胞吸出PBS加入约750μl胰酶消化3min加入75
外源基因进入细胞主要有四种方法:电击法磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞病毒法是利用包装了外源基因的病毒感染细胞的方法使得其进入细胞但是由于电击法和磷酸钙法的实验条件控制较严难度较大病毒法的前期准备较复杂而且可能对于细胞有较大影响所以现在对于很多普通细
【分享】质粒提取原理(转): plantaqp ?? 收录日期: 2010-09-01 ?? 发布日期: 2010-08-22为了方便理解这里罗列一下碱法质粒抽提用到三种溶液:溶液I50 mM葡萄糖 25 mM Tris-Cl 10 mM EDTApH 溶液II N NaOH 1 SDS溶液III3 M 醋酸钾 2 M 醋酸? ? a. 溶液I 中50 mM葡萄糖是干什么的呢加了葡萄糖
#
渲染农场渲染流程计算中心主要负责把客户提供的场景文件通过大量计算机节点运算输出为可视的序列或媒体文件影响渲染结果的因素很多渲染基本流程如下1亲自光临该平台渲染的客户首先需要填写一张渲染记录单之后该平台工作人员就会为您的项目安排机器渲染2外地客户或通过网上上传过来渲染的客户你们只需把渲染场景渲染参数设置好和相关材质准备好后发送至我们即可3渲染之前该平台工作人员会让您确定好每个镜头的单帧渲染效果
#
QIAGEN质粒纯化试剂盒 程序:从生长良好的选择性培养基中挑取一个单个菌落接种到一个含有适当抗生素的25mlLB培养基中培养37℃快速摇动培养(300rpm)8小时用一个管或瓶装最少4次培养的量用LB选择培养基将培养物从1500稀释到11000给高复制的质粒接种25ml或100ml培养基给低复制的质粒接种100ml或500ml培养基37℃快速摇动培养(300rpm)1216小时用一个瓶或容器装最
质粒DNA酶切连接转化筛选鉴定? (2011-04-29 10:42:22) javascript: ▼质粒DNA酶切连接转化筛选鉴定实验目的1学习和掌握限制性内切酶的特性2掌握对重组质粒进行限制性内切酶酶切的原理和方法3掌握利用CaCl2制备感受态细胞的方法4学习和掌握热击法转化的原理和方法5掌握α互补筛选法的原理6学习用试剂盒提取重组质粒DNA的方法7复习琼脂糖凝胶电泳的原理及方法实
违法有害信息,请在下方选择原因提交举报