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  细胞培养经验谈细胞生存所需营养和添加物氨基酸 合成蛋白质糖 葡萄糖为主提供能量代谢激素 很多激素具有促细胞生长作用谷氨酰胺 促进氨基酸进入细胞膜是核酸的成分(注意：备用培基放置15天后需要补充谷氨酰胺)抗菌素 青霉素100单位 毫升链霉素100微克毫升制霉菌素25单位毫升 微量元素生物刺激源 有些细胞须特殊刺激因子例ECGFNGFTGFFGFHGFEGF等生长

• 细胞培养的一点经验.ppt

  传代时尽量避免吹打细胞如果必须要吹打动作要轻柔不要用力过猛并避免气泡出现这些都对细胞有损伤 复苏时应迅速复温缓慢稀释并保证较高的细胞密度 冻存运输 使用干冰置于塑料泡沫盒中处理得当可以保存3天一旦出现融解细胞活力将急剧下降 将细胞冻存管严密包裹所用塑料泡沫盒应该不小于300× 300× 300mm壁的厚度约为50mm内部空间为200×

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  细胞培养实验方法在做传代细胞培养之前首先将培养瓶置于显微镜下观察培养瓶中细胞是否已长成致密单层如已长成单层即可进行细胞的传代培养1.营养液配制:EMEM液 90犊牛血清 10双抗(1万单位／m1) 加至约100单位／m1 3谷氛酞胺

• 细胞培养.doc

  常用设备 准备室的设备： 单蒸馏水蒸馏器双蒸馏水蒸馏器酸缸烤箱高压锅储品柜(放置未消毒物品)储品规(放置消毒过的物品)包装台配液室的设备：扭力天平和电子天平(称量药品)PH计(测量培养用液PH值)磁力搅拌器(配置溶液室搅拌溶液)培养室的设备：液氮罐储品柜(存放杂物)日光灯和紫外灯空气净化器系统低温冰箱(-80℃)空调二氧化碳缸瓶边台(书写实验记录)必须放在无菌间的设备：离心机(收集细胞)超净

• 细胞培养.doc

  细胞培养动物细胞培养工作的基本要求培养前准备：做好实验计划和操作程序准备好所需器材和物品操作间消毒：紫外线照射30min实验结束后75酒精擦拭工作台洗手和着装：穿拖鞋无菌衣带帽子口罩洗手后带手套火焰消毒：首先点燃酒精灯一切操作均需在火焰近处并经过烧灼进行注意：⑴金属器械灼烧的时间不可太长以防退火⑵吸过培养基的吸管不能再用火焰灼烧⑶开启关闭长有细胞的培养瓶时灼烧时间要短⑷胶塞过火焰不可时间长5实验中

• 细胞培养.doc

  培养基的配制：实验步骤：在超净台内安装好滤器用去离子水溶解1640培养基并用磁力搅拌器搅拌2 h使之充分溶解在超净台内过滤分装到250 mL的玻璃瓶内用封口膜封好-20℃保存过滤结束时还要取少许培养基进行菌培验证培养基是否是无菌?胎牛血清的处理：没有灭活的血清中含有补体成分需要将血清在56℃条件下灭活30 min在水浴锅内进行灭活的过程中要不停地摇晃使受热均匀防止沉淀析出来注意：刚取出的冻存

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  简单介绍一下细胞培养技术本人这段时间主要做细胞工作和大家共勉吧细胞培养技术一细胞培养的条件和要求 二细胞分离 三.体外培养细胞龄的计算四.细胞鉴别试验 五细胞计数六细胞传代 七细胞的冻存和复苏 八细胞培养用水处理 九选择小牛血清的微量细胞培养检查法 十葡萄糖测定法 十一乳酸测定法十二细胞培养方式仪器专场展示： HYPERLINK :.instrumentzcel

• 细胞培养.doc

  复苏细胞用品：保温桶液氮桶15ml离心管移液器培养瓶酒精酒精灯废液缸细胞培养液准备37oC水浴桶培养液预热到37oC.（避免培养液重复预热每次取足量培养液操作即可）加9ml培养液到15ml的离心管中从液氮中迅速取出冻存管37oC温水中快速摇动至冰核消失（3分钟内勿把整个冻存管浸入水中）快速用70酒精擦拭放入洁净台冻存管口迅速过火开盖手持无菌吸管将细胞加入含有培养液的离心管中用1ml培养液冲洗冻存管

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