葡聚糖凝胶是多聚葡聚糖和环氧氯丙烷相互交联形成的三维网状结构见图通过控制二者的配比及交联时的反应条件获得具有不同网眼(孔隙)的凝胶交联度越大网眼越小交联度越小网眼越大网眼(孔隙)的大小决定了被分离物质能够自由出入凝胶内部的分子量范围一般从几百到数十万不等葡聚糖凝胶层析法分离混合物
目 的5上样与收集 打开出口排水当胶床与上方水层的弯月面相切时加入混合样液上样完毕开始收集一号管每管收集洗脱液2mL 当样液进入胶床其弯月面与胶平面相切时暂停排液用滴管将洗脱剂沿柱内壁旋转着加入1cm高水位然后排液至其弯月面与胶平面相切再缓缓注入35cm高的洗脱剂6洗脱 不断向柱内加洗脱剂保持胶床上水位35cm出口流速控制在每6秒1滴直至收集到6号管达2m
实验二、葡聚糖凝胶柱层析1、目的与要求: 11、学习凝胶(Gel)层析法的基本原理; 12、掌握葡聚糖凝胶(Sephadex)柱层 析的操作技术。2、概述及原理: 凝胶 是一类不溶于水,在水中却有较大膨胀度和较好的分子筛功能,具有立体网状结构的物质(如葡聚糖、琼脂糖、聚丙烯酰胺等)。 21、能用于层析的凝胶主 要有下面几种: 目前主要有葡聚糖凝胶(商品名为Sephadex),天然琼脂
实验二 氨基酸的分离鉴定——纸层析法实验目的掌握氨基酸纸层析的方法和原理学会分析待测样品的氨基酸成分 学习用纸层析法分离鉴定氨基酸二实验原理⑴ 纸层析是以滤纸为惰性支持物的分配层析滤纸纤维上的羟基具有亲水性吸附一层水作为固定相有机溶剂为流动相当有机相流经固定相时物质在两相间不断分配而得到分离 溶质在滤纸上的移动速度用Rf值表示:Rf=原点到层析斑点中心的距离原点到溶剂前沿的距离 在一定的条件
凝胶基质一凝胶的处理 Sephadex G-100干粉经蒸馏水室温充分溶胀48h或沸水浴中煮沸2h冷却至室温后抽真空脱去颗粒空隙中的空气
DNA的琼脂糖凝胶电泳鉴定: DNA分子在琼脂糖凝胶中有电荷效应和分子筛效应DNA分子在高于等电点的溶液中带负电荷它在电场中向正极移动在一定的电场强度下DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应即具有不同的相对分子量的DNA片段泳动速度不同DNA片断在凝胶中当用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙锭(EB)染色后在紫外光下可见橙红色带并可确定DNA片断在凝胶中的位置(14) DNA分子量Markers:
诚信考试 沉着应考 杜绝违纪浙江大学2008–2009学年夏学期《 医学生物化学实验 》课程期末考试试卷开课学院: 医学院 考试形式: 闭 卷允许带___________入场考试时间: 2009 年 6 月 27 日所需时间: 60 分钟考生: _____: 专业: ______考生承诺:我确认本次考试
蛋白质含量的测定(考马斯亮蓝法和Fulin酚法) 8学时 正交法寻找蔗糖酶的最适反应条件 8学时_:::赵永芳. 生物化学技术原理及应用.北京. 科学出版社.2002沈同 王镜岩.生物化学.高等教育出版社.2002高效液相色谱仪凝胶层析原理实验步骤(一)卵球蛋白的沉淀7—
二实验原理影响Rf值的因素有: ①物质本身的化学结构 ②展层所用溶剂系统 ③展层剂pH值 ④展层时的温度 ⑤展层所用滤纸 ⑥展层的方向(横向上行或下行)用纸层析鉴定样品时一般都与标准品相比较若没有标准品可选择文献记载的该物质层析条件根据文献Rf值进行鉴定
Chapter 43 Gratings and SpectraChapter 43 Gratings and Spectra4182022143-1 Multiple Slits418202224182022341820224 1. The spacing of the fringes is determined by the slit separation d independ
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