单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级基因操作的工具酶 连接酶类 主要内容: DNA连接酶(ligase) 基因工程技术常用的两种连接酶一个是大肠杆菌DNA连接酶分子量为7500由NAD供能另一个是T4噬菌体基因编码称为T4DNA连接酶分子量为6000由ATP供能 E·coli DNA ligase……NAD﹢
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前一阵子一直在做双酶切质粒重组失败了 很多次不过很快改善了 实验方法用2周重组了 14个质粒现就自己的体会谈一下质粒重组的一些个人经验1回收PCR产物:在进行PCR扩增时候给引物两端设计好酶切位点一般说来限制酶的 选择非常重要尽量选择粘端酶切和 那些酶切效率高的限制酶如BamHIHindIII提前看好各的双切酶所用公用的BUFFER以及各酶在公用BUFFER里的效率选好酶切位点后在各个酶的两边
DNA聚合酶和DNA连接酶的比较比较项目DNA聚合酶DNA连接酶??不?同?点形成磷酸二酯键的方式只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核酸片段的3末端的羟基上形成磷酸二酯键是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键不是在单个脱氧核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键是否需要模板以一条DNA链为模板将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来因DNA连接酶不
DNA聚合酶和DNA连接酶的比较比较项目DNA聚合酶DNA连接酶??不?同?点形成磷酸二酯键的方式只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核酸片段的3末端的羟基上形成磷酸二酯键是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键不是在单个脱氧核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键是否需要模板以一条DNA链为模板将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来因DNA连接酶不需要模
质粒DNA酶切连接转化筛选鉴定? (2011-04-29 10:42:22) javascript: ▼质粒DNA酶切连接转化筛选鉴定实验目的1学习和掌握限制性内切酶的特性2掌握对重组质粒进行限制性内切酶酶切的原理和方法3掌握利用CaCl2制备感受态细胞的方法4学习和掌握热击法转化的原理和方法5掌握α互补筛选法的原理6学习用试剂盒提取重组质粒DNA的方法7复习琼脂糖凝胶电泳的原理及方法实
PHP连接MSSQL- Server类????????对SQL SERVER进行操作的PHP类可以执行连接数据库执行SQL语句查询数据获得最后一次插入操作的ID号等功能class DB_Handle{var ClassName = DB_Handlevar Servervar UserNamevar Passwordvar Databasevar LinkID=0var QueryR
光纤连接器原理和分类在光纤通信(传输)链路中为了实现不同模块设备和系统之间灵活连接的需要必须有一种能在光纤与光纤之间进行可拆卸(活动)连接的器件使光路能按所需的通道进行传输以实现和完成预定或期望的目的和要求能实现这种功能的器件就叫连接器光纤连接器就是把光纤的两个端面精密对接起来以使发射光纤输出的光能量能最大限度地耦合到接收光纤中去并使由于其介入光链路而对系统造成的影响减到最小这是光纤连接器的基本要
V35-E1协议转换器有各种型号但是接口类型都是一样的V35接口和E1接口V35接口是固定的连接路由器E1接口有两种75欧和120欧一般缺省设置是75欧的SC-SC
双酶切连接反应的经验1 在双酶切载体时如果2个酶切位点靠得很近必须注意酶切顺序因为有的限制性内切酶要求其识别序列的两端至少保留有若干个碱基才能保证酶的有效切割有的酶要求识别序列两端有多个碱基的则必须先切否则就可能造成酶切失败2 回收PCR产物:回收的PCR产物片段=1:10 一般取前者后者取pmol为单位的DNA转换为为g单位的DNA:(X pmoles×长度bp×650) 1000000 (注:
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