微生物基因工程李刚副教授教学内容一、PCR引物的设计与实验操作技巧;二、基因组文库的建立与筛选;三、定向进化技术在微生物酶制剂研究中的应用;四、原核表达系统的选择和高效表达策略;五、真核表达系统的选择和高效表达策略。一、PCR引物的设计与实验操作技巧聚合酶链式反应、分子克隆及DNA序列分析这三大类实验方法几乎构成了现代分子生物学的实验工作的基础。而三者中,PCR方法在理论上出现最早,在实践中
综述译文
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PCR 引物设计Khorana(1971)等提出在体外经DNA变性与适当引物杂交再用DNA聚合酶延伸扩增DNA的设想1983年Mullis发明了PCR技术使Khorana的设想得到实现1988年Saiki等将耐热DNA聚合酶(Taq)引入了PCR技术1989年美国《Science》杂志列PCR 为十余项重大科学发明之首比喻1989年为PCR爆炸年Mullis荣获1993年度诺贝尔化学奖 5? 5?
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PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段使其能有效地扩增模板DNA序列因此引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否 要设计引物首先要找到DNA序列的保守区同时应预测将要扩增的片段单链是否形成二级结构如这个区域单链能形成二级结构就要避开它如这一段不能形成二级结构那就可以在这一区域设计引物现在可以在这一保守区域里设计一对引物一般引物长度为1530碱基扩增片段长度为100600碱基对让我们
引物长度(primer length)产物长度(product length)序列Tm值 (melting temperature)ΔG值(internal stability)引物二聚体及发夹结构 (duplex formation and hairpin)错误引发位点(false priming site)引物及产物GC含量position) 反映了引物
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级PCB 设计与技巧PCB 概述PCB 设计流程PCB Layout 技巧PCB 概述什么是PCBPCB的种类PCB的基本制作工艺流程什么是PCBPCB 即印刷电路板(Printed CircuiBoard) PCB的主要功能是提供上头各项零件的相互电气连接标准的PCB上头没有零件也常被称为印刷线路板Printed Wiring
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