Gateway技术克隆表达新方法 Gateway技术Gateway技术: 一种克隆操作平台:把目的基因克隆到入门载体(Entry Vector)后就不用依赖限制性内切酶而靠载体上存在的特定重组位点和重组酶高效快速地将目的基因克隆到其它的受体载体(Destination Vector目的载体)上Gateway技术特点: 通过去除冗长的亚克隆步骤节省操作时间同时将目的基因转移到多个表达系
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级Gene25bp25bppEXP-geneEntry-clonepENTR-geneGene100bp100bpKnrccdB125bp125bpDestination-vectorpDESTAprccdB200bp200bpBy-productKnrAprTransform E.coliApr colonies Nex
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Gateway技术能够克隆一个或多个基因进入到任何蛋白表达系统大大简化基因克隆和亚克隆步骤同时克隆效率高达95当基因在目的表达载体之间快速简便的穿梭时还可保证正确的方向和阅读框Gateway技术基于λ噬菌体位点特异重组系统(attB × attP →attL × attR)BP和LR两个反应就构成Gateway技术BP反应利用一个attB DNA片段或表达克隆和一个attP供体载体之间的重组反应创
精子发生受精出生 胚胎分割技术:通过对胚胎进行显微操作将一枚胚胎用显微手术等方法分割成二分四分甚至八分胚经体内或体外培养然后移植入受体中以得到同卵双生或同卵多生后代的技术其理论依据是早期胚胎的每一个卵裂球都具有独立发育成个体的全能性超排的母波尔羊冲卵就是将供体内的胚胎从子宫中冲出冲到缓冲液中临时放置以便观察发育情况波尔羊羔与其养母(莎能奶山羊)IVF-ET的发展史 又被称为体外受
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级基因的克隆与表达基因克隆(gene cloning)基因表达(gene expression) -原核基因表达 -真核基因表达基 因 克 隆 Gene Cloning概述克隆载体受体细胞体外重组的策略基因克隆工作流程一概述确定了遗传信息的携带者即基因的盆子载体
克隆技术克隆人研究的风险性 目前的动物体细胞克隆技术存在着难以预测和消除的技术风险这已经成为人们在伦理学层面反对克隆人的一个重要科学依据 克隆人将存在着较多的风险性 无论是科学家还是普通始终都是从动物克隆技术发展的现况来类比克隆人研究的发展前景并作为进一步推论的逻辑基础也即是目前的动物克隆实验仍然处于初始阶段克隆技术还很不成熟在动物克隆实验中出现的高失败率高风险使用了大量的重组卵细胞大量
Gateway技术提供以下可能: 通过去除冗长的亚克隆步骤节省您的时间同时将您的基因转移到多个表达系统在任何您选择的系统――体外细菌酵母昆虫或哺乳动物――分析表达一一种更好的克隆方法Gateway技术能够克隆一个或多个基因进入到任何蛋白表达系统(图1)这项强大的体外技术大大地简化了基因克隆和亚克隆的步骤而同时典型的克隆效率高达95或更高当基因在目的表达载体之间快速简便的穿梭时还可以保证正确的
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