生物化学研究进展?作业??题目?????蛋白质的提取纯化??????????????????????????????????????????????班级???????????????????专业??????????????????????题目:蛋白质的提取纯化?:??专业:??摘??要:本文综述了蛋白质的提取原理及方法蛋白质纯化的意义基本原则及方法蛋白质纯化的前景展望?关键词:提取原理
实验一 氨基酸的分离鉴定——纸层析法实验目的学习氨基酸纸层析的基本原理掌握氨基酸纸层析的操作技术实验原理纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法层析溶剂由有机溶剂和水组成滤纸和水的亲和力强与有机溶剂的亲和和弱因此在展层时水是固定相有机溶剂是流动相将样品点在滤纸上(原点)进行展层样品中的各种AA在两相溶剂中不断进行分配由于它们的分配系数不同不同AA随流动相移动速率就不同于是将这些AA分离开来
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第二部分:蛋白的纯化如何区分蛋白表达在上清还是包涵体破碎细胞后离心分别收集上清和沉淀表达的蛋白可能分布在上清中也有可能分布在沉淀中还有可能是二者中都有分布根据我们实验室的经验超声碎菌之后如果菌液比较清亮沉淀比较少那表达的蛋白基本上是可溶的但如果超声完之后 菌液是浑浊的而且当离心之后离下的沉淀比较多而且沉淀的颜色也比较白那基本上就是包涵体了包涵体是基因重组蛋白在大肠杆菌中高水平表达时所形成 的
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蛋白质的分离与纯化蛋白质分离纯化的基本流程 选择材料和预处理 细胞的破碎及细胞器的分离 蛋白质的抽提 蛋白质的纯化 浓缩干燥和保存一材料的选择和预处理 微生物植物和动物都可做为制备蛋白质的原材料所选用的材料主要依据实验目的来确定 从工业生产角度考虑注意选含量高来源丰富及成本低的原料 对动物组织必须选择有效成份含量丰富的脏器组织为原材料先除去结缔组织和脂肪组织 对预处理好的材料若不立即
蛋白质分离纯化及蛋白质测定方法及评价一、 蛋白质分离纯化方法 研究蛋白质或酶的物理及化学性质,首先需进行纯化 若要研究蛋白质或酶的主体结构及酶的活性中心,催化反应机理等,则还需清除最后残留在分子中的微量其它蛋白和大分子化合物分离蛋白质及酶类要顾及最大的生产量要顾及最大的催化活性要使蛋白及酶纯度尽可能达到最高1 蛋白质分离纯化的技术路线设计及条件蛋白质的分离纯化不可能有一个固定的程序适用于各种蛋白质
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级 生化实验设计 ——蛋白质的提取与分离纯化主讲人:第三组组员:华中师范大学化学学院 已知某蛋白的分子量约为17 kDa等电点3.94.1它能耐一定的高温在90 ?C加热34 min后仍然能够保持80的活性该蛋白含有较多的疏水性残基与Ca2结合后可以暴露它的疏水基团该蛋白的作用是作为生物体内酶的激活剂请设计一个从脑
藻蓝蛋白的提取纯化与鉴定(实验教案) 藻蓝蛋白(phycocyanin PC)是一种存在于蓝藻细胞内的光合色素 能高效捕获光能其分子质量在 40 ku左右 由αβ两个亚基组成 亚基分子质量都在 20 ku 左右肽链上共价结合 1 个开链的四吡咯环辅基 类似动物红细胞的血红素结构天然存在的藻蓝蛋白通常以六聚体(αβ) 6的形式存在与之相近的别藻蓝蛋白(Anthocyanin APC)为三聚
提取蛋白取样:选取生长旺盛的植株叶片(烟草),用自来水冲洗去除表面尘土,再用蒸馏水冲洗,用吸水纸拭去表面水分。称样:称取待测叶片10g(也可稍多)放入研钵中(研钵预先放在 -20度冰箱预冷)。研磨:加入2ml提取介质(即提取buffer),冰上研磨,提取液装在两个15ml离心管中。离心:4℃,12000g离心15min,吸取上清;重复离心一次,取上清。将所提取蛋白分装,部分放在-80度,部分加
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