相关文档

• 抽提质粒是实验室最常规的试验了.doc

  抽提质粒是实验室最常规的试验了由于有一套试验操作步骤于是就按着步骤一步一步操作不理解实验原理是什么掌握各试剂的组分对于试验很有帮助溶液Ⅰ：由葡萄糖EDTATris-HCl组成葡萄糖的作用是增加溶液的粘度减少抽提过程中的机械损伤防止破坏质粒DNAEDTA的作用是络合掉镁离子等二价金属离子防止DNA酶对质粒的降解Tris-HCl是维持菌液溶菌作用的最适合pH值溶液Ⅱ：由SDS与氢氧化钠组成SDS的作用

• 1.实验一：质粒提取实验.ppt

  掌握碱裂解法分离质粒DNA的基本原理和操作要点了解限制性内切酶作用的原理特点和酶切质粒DNA的试验方法学习琼脂糖凝胶电泳检测DNA的方法和技术4X质粒提取过程必需缓和不能剧烈振荡操作过程避免污染反应体系中各试剂用量准确EB是一种诱变剂操作时必须戴塑料或乳胶手套

• 实验九质粒提取.ppt

  实验九质粒提取实验目的： 1了解碱裂解法提取质粒的基本原理2掌握质粒提取的基本操作步骤 实验原理质粒提取关键： 基因组DNA与质粒DNA的有效分离大肠杆菌染色体DNA：约4700 kb质粒DNA: 如 pUC18：约注意事项:

• 质粒抽提.doc

  质 粒 提 取一导论 ? 　　已经提出过许多方法用于从细菌中提纯质粒DNA 这些方法都含有以下3个步骤：1.  l （一）细菌培养物的生长 细菌培养物的生长2.  l （二）细菌的收获和裂解 细菌的收获和裂解3.  l (三)质粒DNA的纯化 质粒DNA的纯化?（一）细菌培养物的生长?　　从琼脂平板上挑取一个单菌落接种到培养物中(有含有行当抗生素的液体培养基中生长)然后从中

• 质粒抽提.doc

  质粒抽提从甘油菌或平板接种至50ml LB培养基37℃ 250rpm培养5－8h(早上做)1转接至2L LB培养基37℃ 200rpm 过夜5000rpm 10min离心收集菌体称重按10mlg菌 加入裂解液I(可用纯化水代替)重悬菌体置于冰上按10mlg菌 加入裂解液II小心混匀冰上放置5－10min按8mlg菌 加入裂解液III轻柔混匀室温放置5min10000rpm 10min离心收

• 质粒DNA抽提.doc

  实验二 质粒DNA抽提一 实验原理质粒是细菌DNA染色体外的小型双链环状DNA复制子对细菌的某些代谢活动和抗药性表型具有一定的作用质粒载体是在天然质粒的基础上人工改造拼接而成质粒提取方法包括三个步骤：细菌的培养细菌的收集和裂解以及质粒DNA 的分离和纯化本实验采取的碱裂解法分离质粒的原理：在碱性环境中线性的大分子量细菌染色体DNA被变性而共价闭环（CC）质粒DNA仍为自然状态将pH调至中性并在高

• 实验室常规操作.ppt

  测漏：取一个透明的容器装上水将需要测试的移液器装上吸头吸上水如果是量程较小的移液器请将吸头浸入液面1—2毫米静待20秒观察吸头内部液面是否下降 如果是量程大的移液器（20-200ul100-1000ul等）请将吸头朝下悬垂20秒观察是否有液体下滴 如果出现漏气：A检查吸头安装是否到位换掉吸头再次测试以排除因吸头的关系

• 实验七质粒DNA的提取和鉴定.ppt

  实 验 七 质粒DNA的提取和鉴定 目的 掌握碱裂解法提取质粒的方法 了解质粒酶切鉴定原理质粒DNA能从细菌中提出来又能再转入细菌这个过程称转化转入的质粒DNA仍能进行复制产生多个拷贝提纯的思路质粒的特性：共价闭合环状的小分子量DNA要去除的物质：　蛋白　基因组DNA　脂类及小分子杂质　RNA 质粒DNA的提取方法方法：碱裂解法煮沸裂解羟基磷灰石柱层析法质粒DNA释放法酸酚法等

• 实验一-质粒DNA的提取和鉴定.ppt

  质粒DNA的提取和纯化 郑敏生化与分子生物学系分子生物学从分子水平上研究生命现象物质基础的学科。研究细胞成分的物理、化学的性质和变化以及这些性质和变化与生命现象的关系，如遗传信息的传递，基因的结构、复制、转录、翻译、表达调控和表达产物的生理功能，以及细胞信号的转导等。 基因工程移液器和EP管质 粒质粒主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中，独立于染色体之外的、能自主复制的双链环状脱氧核糖核酸物质。质粒

• 实验室安全-实验室常识.doc

  实验室安全守则(1)在使用或水样中含有高浓度的酒精乙醚苯丙酮等易挥发和易燃物质时要远离火源(2) 能产生有毒或有刺激性气体的实验要在通风橱内进行(3) 在使用浓硫酸浓硝酸浓碱洗液液溴氢氟酸及其它有强烈腐蚀性的液体时要十分小心切勿溅在衣服皮肤尤其是眼睛上稀释浓硫酸时必须将浓硫酸缓慢地倒入水中并不断搅拌决不能把水倒入浓硫酸中以免迸溅(4) 不允许用手直接去取用固体药品不能将药品任意混合氯酸钾硝酸钾高锰