单击此处编辑母版文本样式第二级单击此处编辑母版标题样式第03章 蛋白质的性质和分离纯化Properties and Purification of Protein生 物 化 学Biochemistry生命科学与技术学院 陈吉宝 蛋白质是一种两性电解质1蛋白质的酸碱性质pH=6蛋白质份子表面分布着不同的电荷蛋白质等电点:使某特定蛋白质分子上所带正负电荷相等时溶液的pH值为蛋白质的等电点(pI)蛋白
第七章 蛋白质的分离纯化和表征第一节 蛋白质的酸碱性质各个解离基团的pK 值与游离氨基酸的不完全相同等电点要用等电聚焦等方法测定第二节 蛋白质分子的大小与形状一根据化学组成测定最低相对分子质量假定某种微量成分只有一个测出其百分含量后可用比例式算出最低相对分子质量若测出两种微量成分的百分含量分别用比例式算出的最低相对分子质量不相同时可计算两个最低相对分子质量近似的最小公倍数例题:一种纯酶含亮氨
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第七章 蛋白质的分离纯化和表征第一节 蛋白质的酸碱性质各个解离基团的pK 值与游离氨基酸的不完全相同。等电点要用等电聚焦等方法测定。第二节 蛋白质分子的大小与形状一、根据化学组成测定最低相对分子质量假定某种微量成分只有一个,测出其百分含量后,可用比例式算出最低相对分子质量。若测出两种微量成分的百分含量,分别用比例式算出的最低相对分子质量不相同时,可计算两个最低相对分子质量近似的最小公倍数。例题:
蛋白质分子中有很多酸性和碱性解离基团是具有两性解离性质的化合物各种解离基团的解离度与溶液的pH有关pH越低碱性解离度越大蛋白质分子带正电荷越多负电荷越少pH升高则解离情况相反 二蛋白质的分子大小与分子量的测定=16700cLogM 透析:利用半透膜的选择通透性来纯化象蛋白质这样的大分子物质的过程叫透析 超过滤:是利用压力或离心力强行使水和其他小分子溶质通
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级1蛋白质的分离纯化和表征第 7 章P291一蛋白质的酸碱性质 蛋白质分子中有很多酸性和碱性解离基团是具有两性解离性质的化合物各种解离基团的解离度与溶液的pH有关pH越低碱性解离度越大蛋白质分子带正电荷越多负电荷越少pH升高则解离情况相反
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复旦大学生物化学系黄伟达whuang@,2005年12月8日于华东理工大学 重组蛋白质的表达、复性与纯化为什么要重组基因表达? 1?蛋白质功能研究 2 生物制药和疫苗生产 3?疾病的基因治疗 4?食品、化工用酶制剂 5?抗虫、抗逆植物改良6 细胞代谢产物的富集基因表达体系及优劣势大肠杆菌表达体系蛋白质的复性工作中经常碰到的问题基因表达体系 1?原核体系2 真核体系 大肠杆菌 (Escherich
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级第五章 蛋白质的分离纯化 (一)材料 1选材 2破碎 3混合物的分离 (二)粗分级 (三)细分级 蛋白质粗分级一盐析盐析:蛋白质在高浓度中性盐溶液中会沉淀析出 常用硫酸铵进行沉淀分级沉淀:通过调节硫酸铵的浓度可以使不同的蛋 白质分阶段沉淀下来优点:价格
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