载体与表达系统0001--pIRES --BD Co--真核表达--yshu3507 0002--pECFP-C1--BD Co--真核表达--yshu3507 0003--pShuttle------victoh0004--pSBR322------chujun_hust0005--pcDNA3.1()CAT--invitrogen--真核表达--wangjun20022740006--p
克隆载体:大多是高拷贝的载体,一般是原核细菌,将需要克隆的基因与克隆载体的质粒相连接,再导入原核细菌内,质粒会在原核细菌内大量复制,形成大量的基因克隆,被克隆的基因不一定会表达,但一定被大量复制。克隆载体只是为了保存基因片段,这样细胞内不会有很多表达的蛋白质而影响别的工作。?????? 克隆载体(Cloning vector ):携带插入外源片段的质粒或噬菌体,从而产生更多物质或蛋白质产物。(这
表达载体构建的一般原则1、阅读框架要使目的基因得以表达,最重要的因素是外源目的基因本身必须置于正确的阅读框架之中。用人工接头可以调节阅读框架,选择适当的人工接头,就可使外源基因处于正确的阅读框架中。2、启动子(关键因素)有效的转录起始是外源基因能否在宿主细胞中高效表达的关键步骤之一。因此,选择强的启动子及其相关的调控序列,是构建一个高效表达载体首先要考虑的问题。 3、转录的有效延伸和终止 外源基因
原核表达体系的构建刘华彬董浚键一实验材料(1)植物材料:拟南芥(2)载体及菌株:克隆及测序用载体为pMD18-T购自Takara宿主菌DH5α原核表达载体(pET30c )(3)PCR引物:登陆GeneBank查找目的基因序列以目的基因序列为模板设计引物(4)药品试剂:反转录试剂盒(TaKaRa)质粒小提试剂盒(TIANGEN)胶回收试剂盒Taq DNA聚合酶(TaKaRa)dNTPs(TaK
双元表达载体与共整合载体(cointegrating vector) 相对binary vector 指转化由两个载体来完成相容vir基因在实现T-DNA转移过程中没有与T-DNA在同一质粒上小Ti质粒 含T-DNA区而缺少vir区的质粒比如pBIN19 pBI121带vir区的质粒 主要功能是利用vir基因的作用激活T-DNA 的转移比如常用农杆菌菌株LBA4404其中带有这种T-DNA
对于全世界许多研究者 Novagen 的 pET 系统已成为在大肠杆菌中蛋白表达的首选该系统成功的一个主要原因是目标基因被克隆到不为大肠杆菌 RNA 聚合酶识别的 T7 启动子之下因此在加入 T7 RNA 聚合酶之前几乎没有表达发生克隆到 pET 载体的基因实际上是被关闭的不会由于产生的蛋白对细胞有毒性而引起质粒不稳定重组质粒转移到染色体上含有一拷贝由 lacUV5 控制的 T7 RNA 聚合酶基
siRNA表达载体的构建siRNA表达载体构建可以:(1)作为后基因组时代基因功能分析的有力工具;(2)应用于基因组学、细胞信号传导通路分析;(3)用于药物靶点筛选、疾病治疗。实验方法原理:多数的siRNA表达载体依赖三种RNA聚合酶III 启动子(pol III)中的一种,操纵一段小的发夹RNA(short hairpinRNA, shRNA)在哺乳动物细胞中的表达。这三类启动子包括大家熟悉
8.大肠杆菌表达系统与蛋白表达纯化大肠杆菌表达系统遗传背景清楚目的基因表达水平高培养周期短抗污染能力强等特点 是分子生物学研究和生物技术产业化发展进程中的重要工具因此熟练掌握并运用大肠杆菌表达系统的基本原理和常规操作是对每一个研究生来说是非常必要的本章节介绍了实验室常用的大肠杆菌表达系统的构成特点归纳了利用大肠杆菌表达系统纯化重组蛋白的基本流程和详细操作步骤并且结合笔者的操作经验总结了初学者
车载激光雷达系统方案轻小型车载激光雷达系统是北京北斗星通导航技术股份有限针对城市林业生态植被灾害应急地形等三维数据获取等应用推出的一款车载激光雷达产品重量不超过5公斤无需控制点即可以满足大比例尺测图需求集成了高精度IMU存储控制系统激光雷达和GPS是目前集成度最高最轻巧的系统 硬件设备1 POS设备POS设备为惯性导航与卫星导航的组合导航系统其中IMU部分由高精度三轴陀螺仪以及三个坐标轴方向上
2006 年 3 月
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