相关文档

• PCR质粒DNA酶切后电泳鉴定.ppt

  单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级PCR 质粒DNA酶切后电泳鉴定目的要求掌握PCR的原理和操作步骤熟悉限制性核酸内切酶掌握DNA琼脂糖凝胶电泳操作方法实验原理PCR原理反应体系：模板dNTP引物DNA聚合酶Mg2反应条件：变性退火延伸限制性内切酶一类能够识别和切割DNA分子中特定碱基序列的核酸水解酶限制性酶切位点：能够被限制性内切酶特异识别结合并切断的一段

• 质粒DNA的提取与酶切电泳鉴定.ppt

  质粒DNA的提取与酶切电泳鉴定质粒提取关键：基因组DNA与质粒DNA的有效分离 (碱裂解法) 高pH使质粒DNA和染色体DNA变性同时沉淀蛋白质再将pH值调至中性质粒DNA较小很容易复性成双链而染色体DNA较大不会复性缠结成网状不溶物质从而可以通过离心除去注意事项:实验方法 碱裂解法 1挑取携带目标DH5α单菌落于3-5 ml LB(含Amp 100μgml)37℃ 振荡培养过夜(12

• 质粒酶切鉴定.ppt

  粘性末端是交错切割结果形成两条单链末端这种末端的核苷酸顺序是互补的可形成氢键所以称为粘性末端如EcoRI的识别顺序为： 5…… GAATT_C ……3 3…… C_TTAAG …… 5垂直线表示中心对称轴从两侧读核苷酸顺序都是GAATTC或CTTAAG这就是回文顺序（palindrome）_和表示在双链上交错切割的位置切割后生成5……G和AATTC……33……CTTAA和G……5二个DNA片段各有

• DNA酶切及凝胶电泳.doc

  DNA酶切及凝胶电泳第一节 概 述 　　一. DNA的限制性内切酶酶切分析 　　限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上并切割双链DNA它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作用且依赖于ATP的存在Ⅰ类酶结合于识别位点并随机的切割识别位点不远处的DNA而Ⅲ类酶在识别位点上切割DNA分子然后从底物上解离Ⅱ类由两种酶组成:

• 电泳质粒.DNA图片.doc

  总DNA 质粒 重提质粒酶切检测 PCR检测 质粒酶切后回收产物的检测 重提质粒检测 快检 PCR酶切产物的检测图 :

• 质粒DNA的提取及电泳.ppt

  分子生物学实验当你翻开书本的时候，你必须尽可能地展开想象的“翅膀”，否则，你就不能走在别人的前面;而当你进入实验室时，要象脱下你的外衣那样脱下你的想象力，因为实验操作中不能有一丁点儿的想象，否则，你对事物的观察就会受到影响。实验相关知识1、实验准备:2、实验室安全与卫生3、分组与实验操作4、实验报告与成绩评定离心机的使用移液器的使用实验一、质粒DNA的提取纯化实验目的:学习与掌握最常用的质粒DNA

• 质粒提取及酶切图谱鉴定.pdf

  万方数据

• 质粒提取及酶切图谱鉴定.pdf

  #

• 质粒DNA限制性酶切图谱分析.ppt

  2. 限制性核酸内切酶的命名法二琼脂糖凝胶电泳实验原理内切酶活性下降内切酶稀释不正确DNA不纯反应条件不佳内切酶识别的DNA位点上的碱基被甲基化或存在其它修饰部分DNA溶液粘在管壁上内切酶溶液粘度大取样不准酶切后DNA粘末端退火由于反应溶液温度强烈振荡使内切酶变性过度稀释使酶活性降低反应条件不适识别位点两侧插入了可影响酶切效率的核酸顺序检查反应条件：甘油浓度大于12盐度过低Mn2的存在及酶：DN

• 酶切鉴定.ppt

  单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级质粒DNA的酶切鉴定　　　限制性内切酶是DNA操作过程中所使用的基本工具其特异性地结合于一段特殊DNA序列之内或其附近的特异位点上并在此切割双链DNA分子克隆中常用的为II类限制酶其识别位点长度为45或6个核苷酸的反向重复序列限制酶的切割点因酶而异有些产生带平端的DNA片段而另一些产生带有粘性末端的DNA实验原理限制性内切酶切