相关文档

• 12_PCR产物的TA克隆(DNA的胶回收和连接).docx

  7 / NUMS7 PCR产物的TA克隆 (DNA的胶回收和连接)【实验原理】片段回收方法：DNA片段在适当浓度的琼脂糖凝胶中，通上一定电压进行电泳，不同大小的DNA分子由于迁移率的不同而分离开。切下带有所需DNA片段的凝胶，用冻融法、玻璃奶回收法或商品化胶回收试剂盒将目的片段回收纯化。2利用Taq酶能够在PCR产物的3’末端加上一个非模板依赖的A，而T载体是一种带有3’T突出端的载体，在连接酶

• T4-DNA-连接酶（经蓝白克隆验证）.pdf

  产品目录号：

• DNA聚合酶和DNA连接酶的比较.doc

  DNA聚合酶和DNA连接酶的比较比较项目DNA聚合酶DNA连接酶??不?同?点形成磷酸二酯键的方式只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核酸片段的3末端的羟基上形成磷酸二酯键是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键不是在单个脱氧核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键是否需要模板以一条DNA链为模板将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来因DNA连接酶不

• DNA聚合酶和DNA连接酶的比较.doc

  DNA聚合酶和DNA连接酶的比较比较项目DNA聚合酶DNA连接酶??不?同?点形成磷酸二酯键的方式只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核酸片段的3末端的羟基上形成磷酸二酯键是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键不是在单个脱氧核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键是否需要模板以一条DNA链为模板将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来因DNA连接酶不需要模

• 胶回收DNA注意事项.doc

  胶回收DNA注意事项①切胶回收DNA片段是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收所以为了减少胶的体积我们 就可以用相对比较薄的胶来跑电泳通常只要够点样即可或是采用薄而宽的梳子来跑胶这样可减少回收试剂引起的一些后续麻烦②主要还是DNA的浓度 如果DNA浓度不够 想胶小点也不可能③紫外灯下切下含待回收DNA的凝胶时要衬以干净的塑料薄膜使用无DNA污染的新刀片 其目的在于防止外源DNA的污染④利用凝胶回收

• DNA片段的回收.doc

  中 国 海 洋 大 学 实 验 报 告 2010 年 4月 26日晚上第9组 赵钰 专业年级 07级生命基地班 课程 分子生物学实验 题目 DNA片段的回收同组者 刘安 王梓华 040012007174 一：【实验目的】1：学习D

• 阳性克隆鉴定和质粒DNA的提取.ppt

  实验五阳性克隆鉴定和质粒DNA提取 【实验目的】学习大肠杆菌转化阳性克隆的鉴定学习碱法提取质粒DNA的方法和技术 【实验原理】重组质粒转化大肠杆菌宿主细胞后，还需要对转化菌落进行筛选鉴定。利用α互补现象进行筛选是最常用是最常用的一种鉴定方法。现在使用的许多载体（如pUC系列）都带有一个大肠杆菌DNA的短区段，其中含有β-半乳糖苷酶基因（LacZ）的调控序列和β-半乳糖苷酶α肽链氨基端（146个氨基

• DNA和质粒载体的连接反应.doc

  外源DNA和质粒载体的连接反应外源ＤＮＡ片段和线状质粒载体的连接也就是在双链ＤＮＡ５磷酸和相邻的3羟基之间 形成的新的共价链如质粒载体的两条链都带5磷酸可生成４个新的磷酸二酯链但如果质粒ＤＮＡ已去磷酸化则吸能形成２个新的磷酸二酯链在这种情况下产生的两个杂交体分子带有２个单链切口当杂本导入感受态细胞后可被修复相邻的５磷酸和３羟基间磷酸二酯键的形成可在体外由两种不同的ＤＮＡ连接酶催化这两种酶就是大肠杆

• DNA回收.doc

  从低熔点琼脂糖凝胶中回收DNA片段操作步骤1将已经电泳确定的可回收的酶切产物在合适浓度的回收用琼脂糖凝胶进行电泳最好换用新的电泳缓冲液10 × TAE（10 ×Tris-乙酸1将已经电泳确定的可回收的酶切产物在合适浓度的回收用琼脂糖凝胶进行电泳最好换用新的电泳缓冲液10 × TAE（10 ×Tris-乙酸）2当溴酚蓝迁移至足够距离时（至少2 cm以上）在长波紫外灯下观察用清洗过的刀片在目的片段前切

• DNA的亚克隆综合实验方案.doc

  DNA的亚克隆综合实验方案班级：生物科学1班 ：魏小笛 ：108012011087一实验学时：3?二实验类型：综合性实验?三实验要求：必修?四实验目的对已经获得的目的DNA片段进行重新克隆其目的在于对目的DNA进行进一步分析或者进行重组改造等五实验内容(1)目的DNA片段和载体的制备(2)目的DNA片段和载体的连接(3)连接产物的转化(4)重组子筛选六实验过程一目的DN