从低熔点琼脂糖凝胶中回收DNA片段操作步骤1将已经电泳确定的可回收的酶切产物在合适浓度的回收用琼脂糖凝胶进行电泳最好换用新的电泳缓冲液10 × TAE(10 ×Tris-乙酸1将已经电泳确定的可回收的酶切产物在合适浓度的回收用琼脂糖凝胶进行电泳最好换用新的电泳缓冲液10 × TAE(10 ×Tris-乙酸)2当溴酚蓝迁移至足够距离时(至少2 cm以上)在长波紫外灯下观察用清洗过的刀片在目的片段前切
中 国 海 洋 大 学 实 验 报 告 2010 年 4月 26日晚上第9组 赵钰 专业年级 07级生命基地班 课程 分子生物学实验 题目 DNA片段的回收同组者 刘安 王梓华 040012007174 一:【实验目的】1:学习D
DNA纯化回收的方法1.低熔点胶法低熔点胶是向普通琼脂糖的多糖链上引入羟乙基形成的这一变化会使凝胶的熔化点与凝固点均降低低熔点胶在30℃时凝结65℃时熔化这一温度尚不足以使DNA分子变性操作时可先灌一块普通的胶然后用低熔点胶取代其中的回收部分割下的胶加入TE后于65℃保温促使凝胶熔化再加入等体积的酚抽提去除凝胶低熔点胶的另一个特点是电泳回收后可以立即进行酶切连接标记等酶反应因为这类胶中不含有普通琼
胶回收DNA注意事项①切胶回收DNA片段是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收所以为了减少胶的体积我们 就可以用相对比较薄的胶来跑电泳通常只要够点样即可或是采用薄而宽的梳子来跑胶这样可减少回收试剂引起的一些后续麻烦②主要还是DNA的浓度 如果DNA浓度不够 想胶小点也不可能③紫外灯下切下含待回收DNA的凝胶时要衬以干净的塑料薄膜使用无DNA污染的新刀片 其目的在于防止外源DNA的污染④利用凝胶回收
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级实验五 DNA回收及纯化实验目的: 1了解DNA回收与纯化的基本原理2掌握凝胶回收试剂盒的使用方法 实验原理PCR产物酶切产物提取的质粒等DNA样品通过电泳后可以使目的DNA片段与其它DNA杂带酶RNA等杂质有效分离然后通过胶回收的手段将目的DNA从凝胶中分离出来得到纯化的目的DNA胶回收的关键参数:回收产物的质量:纯度完整
产品简介:
实验 二琼脂糖凝胶回收DNA片段及检测5.每100mg最初的凝胶重量加入150?l的异丙醇震荡混匀注意:加入异丙醇可以提高回收率加入后不要离心6.将上一步所得溶液加入吸附柱AC中(吸附柱放入收集管中)12000 rpm离心30-60秒倒掉收集管中的废液注意:如果总体积超过750?l可分两次将溶液加入同一个吸附柱AC中
7 / NUMS7 PCR产物的TA克隆 (DNA的胶回收和连接)【实验原理】片段回收方法:DNA片段在适当浓度的琼脂糖凝胶中,通上一定电压进行电泳,不同大小的DNA分子由于迁移率的不同而分离开。切下带有所需DNA片段的凝胶,用冻融法、玻璃奶回收法或商品化胶回收试剂盒将目的片段回收纯化。2利用Taq酶能够在PCR产物的3’末端加上一个非模板依赖的A,而T载体是一种带有3’T突出端的载体,在连接酶
1988 DNC Keynote AddressThank you. Thank you. Thank you very evening ladies and gentlemen. Buenas noches mis m delighted to be here with you this evening because after listening to George Bush all th
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