等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点实验原理等电聚焦(Isoelectric focusing,简称IEF)是六十年代中期出现的新技术。近年来等电聚焦技术有了新的进展,已迅速发展成为一门成熟的近代生化实验技术。目前等电聚焦技术已可以分辨等电点(pI)只差0001pH单位的生物分子。由于其分辨力高,重复性好,样品容量大,操作简便迅速,在生物化学、分子生物学及临床医学研究中得到广泛的应用。蛋白质分子是典
1193 等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点实验原理等电聚焦(Isoelectric focusing,简称IEF)是六十年代中期出现的新技术。近年来等电聚焦技术有了新的进展,已迅速发展成为一门成熟的近代生化实验技术。目前等电聚焦技术已可以分辨等电点(pI)只差0001pH单位的生物分子。由于其分辨力高,重复性好,样品容量大,操作简便迅速,在生物化学、分子生物学及临床医学研究中得到广泛的应用。蛋白
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级实验九 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳测定蛋白质的等电点一目的要求1.学习和掌握圆盘电泳技术2.学习和掌握等电聚焦电泳测定蛋白质的等电点方法 二原理聚丙烯酰胺等电聚焦电泳(Isoelectric Focusing-PAGE简称IEF-PAGE):利用各种蛋白质pI不同以聚丙烯酰胺凝胶为电泳支持物并在其中加入两性电解质载体(carr
电场下载体两性电解质的变化循环流动等电聚焦示意图 等电聚焦电泳的优缺点
等电聚焦电泳 by Liguofu利用各种蛋白质等电点pI的不同,以pH梯度聚丙烯酰胺凝胶为电泳支持物,在电场作用下,蛋白质迁移至各自的等电点pH处(pI)不再泳动,而浓缩成狭窄的区带,这种分离蛋白质的方法称为聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳(IsoelectricFocusing-,简称IEF-) 基本原理 by LiguofupH梯度-简单扩散平衡法碱性缓冲液酸性缓冲液pH梯度不稳定很少被采用 by
蛋白质的两性性质及等电点的测定 一 实验目的通过实验了解蛋白质的两性性质和等电点的意义及与蛋白质分子聚沉的关系二 实验原理蛋白质是由许多氨基酸组成的故也是两性电解质蛋白质分子中可以解离的基团除末端a-氨基与羧基外还有肽链上氨基酸残基的侧链基团如非a-羧基及氨基胍基咪唑基等基团它们都能解离成带电基团因此蛋白质分子与氨基酸一样在酸性溶液中作碱性解离成为带正电荷的阳离子在碱性溶液中作酸性解离成为带
等电点 等电点时蛋白质的特殊性质 主要应用 等电点沉淀与分离 电泳分离 等电聚焦电泳 目前研究应用情况 等电点的测定pH<pI达到最低大部或全部沉淀下来pI从理论上讲一种蛋白质只有一个等电点 但等电
——蛋白质的等电点测定和沉淀反应【实验器材】蒸馏水(mL)卵清蛋白溶液11
等?电?聚?焦等电点聚焦就是在电泳槽中放入载体两性电解质,当通以直流电时,两性电解质即形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度,当蛋白质放进此体系时,不同的蛋白质即移动到或聚焦于与其等电点相当的pH位置上,电聚焦的优点是:有很高的分辨率,可将等电点相差001-002pH单位的蛋白质分开;一般电泳由于受扩散作用的影响,随着时间和所走的距离加长,区带越走越宽,而电聚焦能抵消扩散作用,使区带越走越窄;
#
违法有害信息,请在下方选择原因提交举报