实验二基因的PCR扩增技术一实验目的1学习PCR反应的基本原理与实验技术2从BCG基因组DNA中PCR扩增Rv1791(PE19)基因二基本原理1PCR类似于DNA的天然复制过程2将待扩增的DNA片段与其两侧互补的两段寡核苷酸引物经变性退火和延伸若干个循环后DNA扩增倍数可达2n倍3DNA的变性和复性 1)加热或强酸碱性作用可以使 DNA双螺旋的氢键断裂双链解离形成单链DNA这称为 DNA的变性2
实验四 PCR扩增技术一.实验目的及背景 多聚酶链式反应(polymerase chain reaction)简称PCR技术是80年代中期发展起来的一种体外扩增特异DNA片段的技术此法操作简便 可在短时间内在试管中获得数百万个特异的目的DNA序列的拷贝PCR技术虽然问世仅数年时间 但它已迅速渗透到分子生物学的各个领域引起了生物技术发展的一次革命目前它在分子克隆 目的基础检测遗传病的基因诊断法医
利用PCR技术扩增目的基因主讲人 周洁深圳罗湖外语学校内容提要介绍PCR技术利用的原理条件和反应过程1. PCR:多聚酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术 2. 原理:DNA双链复制温故而知新DNA的两条链四种游离的脱氧核苷酸ATP解旋酶DNA聚合酶等——体内DNA复制需要的条件模板:原料:能量:酶: 高温变性(解旋为单链)低温复性(引物
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级PCR基因扩增一实验目的通过本实验学习PCR反应的基本原理与实验技术二实验原理PCR是一种由引物介导的选择性体外扩增DNA的方法由美国人B.Mullis于1983年发明包括三个基本步骤:变性(Denature):目的双链DNA片段在94℃下解链退火(Ann
临床基因扩增(PCR)实验室设计探讨1 概述 ????临床基因扩增实验又称PCR实验是专门用来检验艾滋病乙型肝炎禽疫病等病毒感染性疾病的一种检测手段它可以通过将病毒体内所含的基因进行扩增的方法测出一些病毒含量不高的感染者体内是否含有特定的病毒由于该检测方法可以测出普通检验难以检测出的病毒并具有灵敏度高特异性高快捷对样品要求低等优点因此被临床医生广为认可已广泛应用于医院的临床诊断和各防疫检测部门的禽
临床基因扩增检验实验室技术验收报告基因扩增检验实验室基本情况(一)实验室所属法人单位名称: 地址: 邮编: 法定代表人: 实验室负责人:
《黑龙江畜牧兽医》科技版
目的基因片段的PCR扩增与克隆1. PCR技术Polymerase Chain Reaction 聚合酶链反应它是一种模拟天然DNA复制过程在有DNA模板DNA聚合酶(Taq酶)RNA引物和四种dNTP的情况下通过高温变性(90℃-95℃1-2min)低温退火(25℃-37℃1-2min)中温延伸(60℃-75℃90 sec-5min)这样反复循环的过程中在体外扩增特异性DNA片段的分子生
目的基因PCR扩增产物的克隆 [实验原理]产物回收在高离子盐存在的情况下,DNA片断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上,再通过一系列快速的漂洗、离心的步骤去蛋白液和漂选液,将引物、核苷酸、蛋白酶等杂质去除,最后用低盐,高pH值的洗脱缓冲液将纯净DNA从硅基质膜上洗脱。2T载体与PCR产物的连接源DNA与载体分子的连接就是DNA重组,这样重新组合的DNA叫做重组体或重组子。重组的DNA分子是在D
目的基因PCR扩增产物的克隆 [实验原理]产物回收在高离子盐存在的情况下,DNA片断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上,再通过一系列快速的漂洗、离心的步骤去蛋白液和漂选液,将引物、核苷酸、蛋白酶等杂质去除,最后用低盐,高pH值的洗脱缓冲液将纯净DNA从硅基质膜上洗脱。2T载体与PCR产物的连接源DNA与载体分子的连接就是DNA重组,这样重新组合的DNA叫做重组体或重组子。重组的DNA分子是在D
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