B. 转录起始RNA聚合酶结合到启动子上以后使启动子附近的DNA解旋并解链形成转录泡以促使核糖核苷酸与模板DNA配对转录起始即是RNA链上第一个核苷酸键的产生无需引物起始后直到形成9个核苷酸的过程是通过启动子阶段此时RNA聚合酶一直在启动子处之后进入正常延伸 σ因子的作用是负责模板链的选择与转录的起始它是酶的别构效应物使酶专一性识别启动子提高酶对启动子的亲和力酶底结合常数提高103倍降低酶
DNA分子结构:DNA的结构目前一般划分为一级结构二级结构三级结构四级结构四个阶段 1. DNA的一级结构是指构成核酸的四种基本组成单位——脱氧核糖核苷酸(核苷酸)通过35-磷酸二酯键彼此连接起来的线形多聚体以及起基本单位-脱氧核糖核苷酸的排列顺序 每一种脱氧核糖核苷酸由三个部分所组成:一分子含氮碱基一分子五碳糖(脱氧核糖)一分子磷酸根核酸的含氮碱基又可分为四类:腺嘌呤(adenine缩写
细胞内DNA和RNA的显示实验目的:1掌握显示DNA和RNA的方法2熟悉细胞中DNA和RNA的分布实验原理核酸是酸性的它们对碱性染料(派罗宁和甲基绿)具有亲和性DNA分子聚合度更高甲基绿有两个相对的正电荷染成蓝绿色RNA分子聚合度低派罗宁有一个正电荷染成红色实验材料1光学显微镜解剖刀乙醚染料等2蟾蜍实验步骤光镜下观察细胞核(DNA)成绿色细胞质(RNA)呈红色思考题1简述DNA和RNA染色的原理2
DNA (脱氧核糖核酸) 主要存在于细胞核的染色体中 核外也有少量DNA如线粒体DNA(mtDNA)叶绿体DNA(cpDNA)质粒DNA RNA(核糖核酸) 存在于细胞质中如mRNA rRNA tRNA等 除上述DNARNA外还有非细胞形式存在的病毒和噬菌体其或只含DNA或只含有RNA破碎组织细胞DNA的提取:苯酚抽提法采用吸附材料吸附的方式分离DNA时应提供相应的缓冲体系采用有机(酚氯
作用: 1.使蛋白质变性沉淀从核酸提取液中分离除去以防造成蛋白污染 2.使蛋白质变性故可使核糖体解聚释放出核酸 3.某些蛋白质变性剂也有抑制 RNase活性和破裂细胞的作用 提取1. 材料设备及试剂材料:冷冻或新鲜抗凝全血组织样设备:EP管微量取液器(20μl 200μl 1000μl) 台式高速离心机 涡旋振荡器试剂:裂解液 ligsis buffer(40mMT
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核酸分离纯化原则原理:动物和植物组织的脱氧核糖核蛋白(DNP)可溶于水或浓盐溶液(如1molL氯化钠)但在氯化钠盐溶液中溶解度最低而核酸核蛋白(RNP)则在氯化钠中溶解度最大利用这一性质可将其分开方法:先用组织捣碎机将动物肝脏制成组织匀浆再用 氯化钠溶液把细胞中的 RNP 提取出来最后用酚将RNA和蛋白质分开地衣酚试剂材料:牛肝试剂: 氯化钠标准RNA溶液:100μgmL地衣酚(35-二羟基甲苯)
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CTAB法提取柑橘DNA参考自:程运江 柑橘体细胞胞质遗传及叶绿体SSR引物开发研究[D]华中农业大学, 2004实验准备工作:1所用离心管、枪头要洗净、烘干(最好灭菌)。2试剂配制:1 M Tris-HCl (pH 80): 称取Tris-Base 121g, 加入约800 ml 水在磁力搅拌器上搅拌,使其充分溶解后加入浓盐酸调整pH至80后加水定溶至1000 ml 灭菌后于室温保存。05
(分) A.三级 B.四级 C.六级 D.八级 2?(分) A.花斑病 B.艾滋病 C.侏儒 D.猫叫综合症 3?(分) A.手术 B.绝育 C.置换基因 D.以上均不可以 正确答案: C 多选题(0分) 多选少选均不得分 判断题(40分) 1?(分) 是 否 2?(分) × :
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