单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级RNA提取结果分析 2006.04.28100mg小鼠肝脏组织 液氮中研磨 组织碎末立即
果蝇总RNA和总蛋白的提取与电泳条带分析摘 要:本实验第一部分用果蝇成体为材料以Trizol为提取液提取total RNA进行反转录制备cDNA通过琼脂糖凝胶电泳检测total RNA和cDNA浓度并结合电泳图谱对total RNA和cDNA图样进行分析第二部分以果蝇幼体为材料提取总蛋白通过SDS-PAGE检测果蝇总蛋白表达对表达结果进行简要分析并比较了成体和幼体果蝇的蛋白表达差异关键词:果蝇t
RNA的提取及定量检测RNA的提取及定量检测RNA降解的主要因素及RNase的去除DNA污染的解决方案RNA的质量检测RNA降解的主要因素体内RNase的影响样品取材要新鲜,并且在液氮或-70℃冰箱中冻存。RNA提取试剂的选择,TRIzol Reagent 或试剂盒。匀浆器或是研钵;破碎细胞要快速;尽量在低温下进行。体外RNase的影响空气中的RNase试剂中带有的RNase实验耗材实验者本身体外
一总的RNA的提取基础知识:(1)DEPC:中文名为焦碳酸二乙酯分子式为C6H10O5分子量为是一种强烈的RNA酶抑制剂它通过和RNA酶的活性基团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性从而抑制酶的活性 DEPC水一般是指千分之一浓度的DEPC在搅拌器上搅拌至完全溶解即看不到油珠为止 DEPC气味芳香浓烈强挥发性有毒需在通风橱中操作(2)RNA分子:哺乳动物细胞有3种rRNA:28S18S和5S一个典型的哺
实验名称:总RNA的提取分离mRNA的分离实验目的: 研究基因的表达和调控时常常要从组织和细胞中分离和纯化RNARNA质量的高低常常影响cDNA文库RT-PCRNorthern Blot点杂交及5 RAGE等分子生物学实验的成败实验原理:Trizol是一种新型总RNA抽提试剂内含异硫氰酸胍和酚等物质能迅速破碎细胞和溶解细胞中的其它成分抑制细胞释放出核酸酶维持细胞中RNA的稳定加入氯仿离心后RNA进
DNA和RNA提取方法及原理 和 提取方法及原理 DNA提取专题 DNA提取专题第一部分: 第一部分:DNA提取方法简介 提取方法简介 第二部分: 第二部分:DNA提取常见问题分析及对策 提取常见问题分析及对策 前言 DNA是遗传信息的载体是最重要的生物 是遗传信息的载体 是遗传信息的载体 信息分子是分子生物学研究的主要对象 信息分子是分子生物学研究的主要对象为 了进行测序杂交和基因的表达获得高分
DNA (脱氧核糖核酸) 主要存在于细胞核的染色体中 核外也有少量DNA如线粒体DNA(mtDNA)叶绿体DNA(cpDNA)质粒DNA RNA(核糖核酸) 存在于细胞质中如mRNA rRNA tRNA等 除上述DNARNA外还有非细胞形式存在的病毒和噬菌体其或只含DNA或只含有RNA破碎组织细胞DNA的提取:苯酚抽提法采用吸附材料吸附的方式分离DNA时应提供相应的缓冲体系采用有机(酚氯
作用: 1.使蛋白质变性沉淀从核酸提取液中分离除去以防造成蛋白污染 2.使蛋白质变性故可使核糖体解聚释放出核酸 3.某些蛋白质变性剂也有抑制 RNase活性和破裂细胞的作用 提取1. 材料设备及试剂材料:冷冻或新鲜抗凝全血组织样设备:EP管微量取液器(20μl 200μl 1000μl) 台式高速离心机 涡旋振荡器试剂:裂解液 ligsis buffer(40mMT
CTAB法提取柑橘DNA参考自:程运江 柑橘体细胞胞质遗传及叶绿体SSR引物开发研究[D]华中农业大学, 2004实验准备工作:1所用离心管、枪头要洗净、烘干(最好灭菌)。2试剂配制:1 M Tris-HCl (pH 80): 称取Tris-Base 121g, 加入约800 ml 水在磁力搅拌器上搅拌,使其充分溶解后加入浓盐酸调整pH至80后加水定溶至1000 ml 灭菌后于室温保存。05
cDNA各片段的克隆1)总RNA的提取:用TRIZOL Reagent试剂提取总RNA试验操作前所有的玻璃器皿均高温高压灭菌然后180℃烘烤4 h以上塑料枪尖器皿等用DEPC水浸泡过夜然后高温高压灭菌所用试剂用无RNAase水配制无RNAase水制备:双蒸水配制DEPC溶液过夜高温高压灭菌RNA提取步骤:取 g-80℃冻存的组织放入加有1 ml TRIZOL Reagent的玻璃匀浆器中迅速匀浆转
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