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半数组织培养感染剂量法测定淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒优势分析连亨宁成都军区总医院呼吸内科成都 610083摘要:目的 寻找简便的淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒LCMV病毒滴度测定方法方法 采用半数组织培养感染剂量(TCID50)法检测LCMV病毒滴度记录期间细胞形态变化结果 实验后第5天获得与空斑实验一致的病毒滴度结果但实验流程更为简单结论 TCID50法测定LCMV病毒滴度相对于空斑实验更为简便关键词:
杆状病毒的研究进展1.杆状病毒作为基因治疗载体的研究进展:将基因高效导入细胞是基因治疗的技术关键我们构建了一个含有CMV启动子启动的绿色荧光蛋白基因的重组AcMNPV并用其作为基因转移载体转导哺乳动物原代椎间盘细胞AcMNPV介导报告基因-绿色荧光蛋白基因在该原代细胞中能高效表达200 MOI时病毒在该细胞中表达报告基因百分比最高(87)且表达时相可持续较长时间此外杆状病毒的转导对细胞没有明
Transient Transfect 293FT cells to produce VSVG pseudotyped lentiviral vectorTitrate the lentiviral vector stockDay 0 Seed 293FT cells in 24 wells plates (5×104 cells per well)Day 1Count cells number
病毒滴度测定a 感染前24小时,把1x 105个/孔293细胞传代至96孔板中,加入完全培养基至终体积200ul;b 把上述重悬的病毒粒子进行10倍梯度稀释,共12个梯度,用含4 μg/ml polybrene的完全培养基进行稀释; c 然后把90ul梯度稀释的病毒加入提前接种293细胞的96孔板中,培养液终体积为90ul,感染24小时后移除旧完全培养基,加入200ul完全培养基;d 48-72
慢病毒包装、纯化、滴度测定及感染一、包装1包装细胞Lenti-X? Lentiviral Expression Systems User (P11); Lenti-X? shRNA Expression Systems User (P16)2病毒载体及包装质粒病毒载体:DNA组构建及中量提取;包装质粒:商品化产品(Lenti-X? Lentiviral Expression Systems Us
病毒滴度测定-针对没有绿色荧光蛋白标记的病毒a 转染前24小时,把2x 105个/孔293细胞传代至6孔板中,加入完全培养基至终体积2ml;b 把上述重悬的病毒粒子进行10倍梯度稀释,共10个梯度,用含4 μg/ml polybrene的完全培养基进行稀释; c 然后把1ml梯度稀释的病毒加入提前接种293细胞的6孔板中,培养液终体积为3ml,感染24小时后移除旧完全培养基,加入含200μg/m
病毒滴度测定a 感染前24小时,把1x 105个/孔293细胞传代至96孔板中,加入完全培养基至终体积200ul;b 把上述重悬的病毒粒子进行10倍梯度稀释,共12个梯度,用含4 μg/ml polybrene的完全培养基进行稀释; c 然后把90ul梯度稀释的病毒加入提前接种293细胞的96孔板中,培养液终体积为90ul,感染24小时后移除旧完全培养基,加入200ul完全培养基;d 48-72
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