编号:3-4主题:RNA结合蛋白免疫沉淀概述:RIP技术(RNA Binding Protein Immunoprecipitation,RNA结合蛋白免疫沉淀),是研究细胞内RNA与蛋白结合情况的技术,是了解转录后调控网络动态过程的有力工具,能帮助我们发现miRNA的调节靶点。运用针对目标蛋白的抗体把相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来,然后经过分离纯化就可以对结合在复合物上的RNA进行分析。RI
编号:3-6主题:RNA-蛋白 Pull-Down概述:此方法是利用脱硫生物素末端标记的 RNA 和链霉亲和素磁珠标记的来高效富集RNA 结合蛋白(RBP)。RNA-蛋白Pull-Down的原理是将RNA与链霉亲和素磁珠结合。之后在蛋白质-RNA结合缓冲液中平衡RNA结合的磁珠,再加入蛋白裂解液。随后添加适当的缓冲液、涡旋振荡,并在磁力架上分离,洗涤磁珠。最后样品可通过非变性的生物素洗脱缓冲液或
编号:1-4 主题:免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)概述:免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是一种以抗体和抗原之间的特异免疫反应为基础,研究蛋白质与蛋白质间相互作用的经典方法。其基本原理是在细胞裂解液中加入抗原特异性的抗体,抗体、抗原、以及与抗原具有相互作用的蛋白质通过抗原与抗体之间免疫沉淀反应将形成免疫复合物,经过纯化,
编号:1-4 主题:免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)概述:免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是一种以抗体和抗原之间的特异免疫反应为基础,研究蛋白质与蛋白质间相互作用的经典方法。其基本原理是在细胞裂解液中加入抗原特异性的抗体,抗体、抗原、以及与抗原具有相互作用的蛋白质通过抗原与抗体之间免疫沉淀反应将形成免疫复合物,经过纯化
编号:3-2主题:凝胶迁移或电泳迁移率实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)概述: 凝胶迁移或电泳迁移率实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和
编号:3-5主题:荧光原位杂交技术(Fluorescence in situ hybridization, FISH)概述:原位杂交技术是以核酸分子碱基互补配对的原理为基础的实验技术。通过标记的核酸分子(探针,Probe)与目标核酸分子杂交,再用相应的方法检测探针的存在,从而揭示靶部位目标分子的位置。最早的原位杂交技术出现于 1969 年,Gall 和 Pardue 利用H3标记的核糖体 RNA
编号:3-3主题:染色质免疫共沉淀技术(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)概述:真核生物的基因组DNA以染色质的形式存在。因此,研究蛋白质与DNA在染色质环境下的相互作用是阐明真核生物基因表达机制的基本途径。染色质免疫沉淀技术(chromatin immunoprecipitation assay, CHIP)是目前唯一研究体内DNA与蛋白质相互作用的方法。它
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免疫球蛋白(IgG IgA IgM)综述 人类的免疫系统可按以下两种方法进行划分:—— 胸腺(T)淋巴系统:它是一组含有免疫调控和消除抗原功能的细胞异质组—— 囊或骨髓(B)淋巴系统:B淋巴在接受到抗原刺激后合成并分泌出抗体 Ig是一组具有抗体功能的异质蛋白它们能够与抗原相结合抗原结合处的结构是根据与抗体反应的抗原的构造所决定的Ig具有以下功效:—— 形成携抗原免疫复合体—— 与防护细
编号:1-2主题:免疫组化技术概述:免疫组织化学(Immunohistochemistry)是组织化学的分支,它是用标记的特异性抗体(或抗原)对组织内抗原(或抗体)的分布进行组织和细胞原位检测的技术。凡是组织细胞内具有抗原性的物质,如肽类、激素、神经递质、细胞因子、受体、表面抗原等均可用免疫组织化学方法显示,因而目前在基础与临床科研中被广泛应用。免疫组织化学染色方法分类:1、按标记物质的种类,如
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