单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级第1章 DNA重组克隆的单元操作 1作为一个理想的载体应具备以下条件: (1)能够在宿主细胞中存在并繁殖有功能良好的复制子和启动子使插入基因复制和表达(2)具有多个限制性内切酶的切点且切点是单一的这样可将多个外源DNA片段插入其中(3)具有容易检测的筛选标记(4)载体DNA的分子量适当可容纳较大的外源DNA片段又可
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级第四章 DNA重组 DNA分子内 或分子间发生遗传信息的重新组合称为遗传重组 (genetic rbination)或者基因重排(gene rearrangement) 重组产物为重组体DNA (rbinant DNA) DNA的重组广泛存在于各类生物真核生物基因间重组多发生在减数分裂(meiosi
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DNA克隆常见问题分析及解决方案连接反应的分类(以PCR产物克隆为例)不对称粘性末端连接载体与外源DNA连接处的限制酶切位点消失重组质粒会带有外源DNA的串联拷贝非重组克隆的背景较高 DNA定量分析重组质粒筛选对照插入片段(700 bp 50 ngμl) 1 μl 3. 检测对策未加IPTGX-Gal或其失效抗生素失活敏感菌亦能生长用于制备感受态的菌株退化丢失了某些重要因子 DNA克隆胶回收试剂盒载体谢谢大家
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级Gene25bp25bppEXP-geneEntry-clonepENTR-geneGene100bp100bpKnrccdB125bp125bpDestination-vectorpDESTAprccdB200bp200bpBy-productKnrAprTransform E.coliApr colonies Nex
第六章 DNA重组技术限制性核酸内切酶DNA连接酶逆转录酶DNA聚合酶Ⅰ碱性磷酸酶末端转移酶Taq DNA聚合酶(三)Ⅱ类限制性核酸内切酶识别序列特点 2.Ⅱ类限制性内切酶 能识别并切割特异性的核苷酸序列 通常所说的限制性内切酶即指此类 一限制性内切酶GCCTAGGCCTAG一限制性内切酶一限制性内切酶(六) 甲基化酶二DNA连接酶4.末端转移酶(脱氧核苷酸末端转移酶)片段(DNA聚合酶Ⅰ大
第三章 动物基因工程基础核酸内切限制酶的类型及其主要特性3种不同的亚基寄主特异性的位点无用EcoRI特异识别GAATTC及其互补碱基组成的双链片段3γ32P ATP5突出末端定义:质粒是能自主复制的双链环状DNA分子它们在细菌中以独立于染色体之外的方式存在②λ噬菌体也可以进入溶源循环即注入的DNA整合到大肠杆菌的染色体中以前噬菌体的形式潜伏起来永久保留整合/切割区域真核生物由多细胞组成有明显的
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级第十六章 重组DNA技术RBINANT DNA TECHNOLOGY(GENETIC ENGINEER 基因工程)INTRODUCTION基因克隆 Gene cloning 动物克隆 animal cloning人类基因组计划Human Genome Project 基因病及诊断 genetic disea
生物化学与分子生物学 DNA重组和重组DNA技术DNA Rbination and Rbinant DNA technology第二十一章DNA重组(DNA rbination)是指不同DNA分子断裂和连接而产生DNA片段的交换并重新组合形成新DNA分子的过程。重组DNA技术(rbinant DNA technology)是指在体外将两个或两个以上DNA分子重新组合
生物化学与分子生物学 DNA重组和重组DNA技术DNA Rbination and Rbinant DNA technology第二十一章DNA重组(DNA rbination)是指不同DNA分子断裂和连接而产生DNA片段的交换并重新组合形成新DNA分子的过程。重组DNA技术(rbinant DNA technology)是指在体外将两个或两个以上DNA分子重新组合
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