编号:3-1主题:Luciferase报告基因系统概述:Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中,会发出生物荧光(bioluminescence)。然后可以通过荧光测定仪也称化学发光仪(lum
编号:3-1主题:Luciferase报告基因系统概述:Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中,会发出生物荧光(bioluminescence)。然后可以通过荧光测定仪也称化学发光仪(lum
编号:3-2主题:凝胶迁移或电泳迁移率实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)概述: 凝胶迁移或电泳迁移率实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和
编号:3-5主题:荧光原位杂交技术(Fluorescence in situ hybridization, FISH)概述:原位杂交技术是以核酸分子碱基互补配对的原理为基础的实验技术。通过标记的核酸分子(探针,Probe)与目标核酸分子杂交,再用相应的方法检测探针的存在,从而揭示靶部位目标分子的位置。最早的原位杂交技术出现于 1969 年,Gall 和 Pardue 利用H3标记的核糖体 RNA
编号:3-3主题:染色质免疫共沉淀技术(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)概述:真核生物的基因组DNA以染色质的形式存在。因此,研究蛋白质与DNA在染色质环境下的相互作用是阐明真核生物基因表达机制的基本途径。染色质免疫沉淀技术(chromatin immunoprecipitation assay, CHIP)是目前唯一研究体内DNA与蛋白质相互作用的方法。它
编号:3-6主题:RNA-蛋白 Pull-Down概述:此方法是利用脱硫生物素末端标记的 RNA 和链霉亲和素磁珠标记的来高效富集RNA 结合蛋白(RBP)。RNA-蛋白Pull-Down的原理是将RNA与链霉亲和素磁珠结合。之后在蛋白质-RNA结合缓冲液中平衡RNA结合的磁珠,再加入蛋白裂解液。随后添加适当的缓冲液、涡旋振荡,并在磁力架上分离,洗涤磁珠。最后样品可通过非变性的生物素洗脱缓冲液或
编号:3-4主题:RNA结合蛋白免疫沉淀概述:RIP技术(RNA Binding Protein Immunoprecipitation,RNA结合蛋白免疫沉淀),是研究细胞内RNA与蛋白结合情况的技术,是了解转录后调控网络动态过程的有力工具,能帮助我们发现miRNA的调节靶点。运用针对目标蛋白的抗体把相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来,然后经过分离纯化就可以对结合在复合物上的RNA进行分析。RI
Luciferase 报告基因技术Luciferase 报告基因技术自然界中广泛分布着生物发光有机体,其中包括细菌、真菌、鱼、昆虫等。在这些生物发光有机体中催化生物发光反应的各种酶都称之为荧光素酶(Luciferases),底物则命名为荧光素(Luciferin)。自1986 1987 年首次被当作报告基因使用以来,荧光素酶基因已成为目前运用最广泛的报告基因之一。尽管来自不同物种的荧
有机化学自由讲座蛋白质与核酸 化学01 强伟 张楠蛋白质部分蛋白质简介蛋白质的结构蛋白质的合成蛋白质简介1蛋白质的组成蛋白质多肽α- 氨基酸甘氨酸苯丙氨酸20种必需氨基酸1蛋白质在生命现象中起着决定作用 ①蛋白质是生命体一切组织的基本成分细胞内除水外,其余80%的物质均为蛋白质。 ②蛋白质,碳水化合物和脂肪是人类营养的三要素,是维持生命所不可缺少的物质。蛋白质(多肽)的结构测定蛋白质的结构,初一看
氨基酸 蛋白质 核酸第一节 氨基酸分子中既含有氨基又含有羧基的双官能团化合物称为氨基酸.一分类命名根据氨基酸分子中所含氨基和羧基的相对数目可将氨基酸分为:中性氨基酸其分子中氨基与羧基的数目相等碱性氨基酸其分子中氨基比羧基的数目多酸性氨基酸其分子中羧基比氨基的数目多.碱性氨基酸一般显碱性酸性氨基酸显酸性但中性氨基酸不呈中性而呈弱酸性这是由于羧基比氨基的电离常数大些所致.氨基酸的系统命名法是以羧酸为母
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