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蛋白酶定义1g固体酶粉(或1ml液体酶)在一定温度和pH值条件下1min水解酪素产生1μg酪氨酸为一个酶活力单位以ug(uml)表示福林法(第一法) 原理蛋白酶在一定温度与pH条件下水解酪素底物产生含有酚基的氨基酸(如:酪氨酸色氨酸等)在碱性条件将福林试剂(Folin)还原生成钼蓝与钨蓝用分光光度法测定计算其酶活力 试剂和溶液.1 福林试剂的制备于2000ml磨口回流装置中加入钨酸钠(Na2W
测定方法:硝酸还原酶(NR)测定:试剂: a.1μg/ml 的NaNO2标准液:09857g定溶到1 L,再吸取5ml定容到1L. b.01mol/L PH 75 的磷酸缓冲液:Na2HPO4·12H2O 300905g +·2H2O 24965g 定溶到1 L c.1% 磺胺溶液:1 g磺胺溶于100ml 3 mol/L 的 HCl中(25ml CHl定溶到100ml) d.002% 萘基乙
参考文献:关松荫等编著. 土壤酶及其研究法[M]. 农业出版社1986.周礼凯编著. 土壤酶学[M]. 科学出版社关松荫等1986蔗糖酶:比色法(1) P274-276脲酶:比色法 P294-297蛋白酶:比色法9(1) P302-304磷酸酶:磷酸苯二钠法(2) P312-313过氧化氢酶:容量法 P323蔗糖酶 比色法试剂 (1)
淀粉酶活力的测定方法淀粉酶主要包括α-淀粉酶β-淀粉酶葡萄糖淀粉酶和R-酶它们广泛存在于动物植物和微生物界不同来源的淀粉酶性质有所不同植物中最重要的淀粉酶是α -淀粉酶和β-淀粉酶α -淀粉酶随机作用于直链淀粉和支链淀粉的直链部分α -14糖苷键单独使用时最终生成寡聚葡萄糖α-极限糊精和少量葡萄糖Ca 2能使α-淀粉酶活化和稳定它比较耐热但不耐酸pH 以下可使其钝化 β-淀粉酶从非还原端作用于α
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蛋白酶活性的测定方法(GB/T23527-2009)1 原理 蛋白酶对酪蛋白、乳清蛋白、谷物蛋白等都有很好的水解作用。磷钨酸和磷钼酸混合试剂,即福林-酚试剂,碱性条件下极不稳定,易被酚类化合物还原而呈蓝色反应(钨兰和钨兰混合物)。由于蛋白质中含有具有酚基的氨基酸(酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸),因此,蛋白质及其水解产物也呈此反应。利用蛋白酶分解酪素(底物)生成含酚基氨基酸的呈色反应,来间接测定蛋白
实验五 激活剂抑制剂温度及PH对酶活性的影响目的要求 通过实验加深对酶性质的认识了解测定α-淀粉酶活力的方法二实验原理 酶是生物体内具有催化作用的蛋白质通常称为生物催化剂酶催化的反应称为酶促反应生物催化剂催化生化反应时具有:催化效率好有高度的专一性反应条件温和催化活力与辅基辅酶金属离子有关等特点 能提高酶活力的物质称为激活剂激活剂对酶的作用有一定的选择性其种类多为无机离子和简单
抗氧化酶液(SOD、CAT、APX、POD)可以统一提取称取叶片05g,加5ml(1+4)提取液PH78 Pbs,冰浴研磨,12000g,4℃,20min,上清液即为粗酶提取液。同时酶液可用于测定可溶性蛋白含量和超氧阴离子自由基的含量!注意CAT反应液和APX反应液要现配现用!注:粗酶提取液要全部转移;加入石英砂后离心需配平(超氧化物歧化酶)测量取透明度好的指形管,按下表加入各溶液:试剂(酶)
蛋白酶酶活测定方法及原理Protease activity assay method and principle方法原理福林酚法福林-酚试剂在碱性条件下可被酚类化合物还原呈蓝色钼蓝和钨蓝混合物而蛋白质分子中有含酚基的氨基酸如酪氨酸色氨酸等可使蛋白质及其水解产物呈上述反应利用此原理测定蛋白酶酶活考马斯亮蓝法考马斯亮蓝染料与蛋白质在酸性条件下结合主要是染料与蛋白质中的碱性氨基酸(特别是精氨酸)和芳香族
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