酶联免疫吸附试验检测小麦中呕吐毒素测量不确定度评定的探讨摘要 目的 探讨酶联免疫吸附试验( E L I S A) 检测呕吐毒素( DON ) 测量不确定度的评定方法 按照《 谷物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定 第二法》 分析测量过程的不确定度分量合成各试剂盒检测系统的扩展不确定度结果 总扩展不确定是 ( K= 2 ) 结论 含有测量不确定度的结果基本能反映测量的 真实水平 有助于了解
酶联免疫吸附测定法 免疫学实验基本原理它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于定量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。在这种测定方法中有3种必要的试剂:①固相的抗原或抗体(免疫吸附剂)②酶标记的抗原或抗体(标记物)③酶作用的底物(显色剂)双抗体夹心法,属于非竞争结合测定。它是检测抗原最常用ELISA,适用于检测分子中具有至少两个抗原决定簇的多价抗原。?
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参考管抗原7?酶标二抗:稀释HRP标记羊抗猪IgG每孔100μL37℃作用30min8洗涤9显色:加新鲜配制的TMB底物液每孔100μL室温避光作用15min10加终止液:加50μL?2molL硫酸11读数:用酶标仪检测OD450值
实验九 酶联免疫吸附试验 (Enzyme ?Linked?Immunosorbant?Assay,ELISA)1、掌握抗原和抗体的制备方法 2、掌握酶联免疫分析抗体效价的方法实验目的实验原理用于检测包被于固相板孔中的待测抗原(或抗体)。将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。最后通过酶作用于底
酶联免疫吸附实验免疫酶技术是本世纪60年代末期发展起来的一种免疫检测方法是目前最广泛应用的标记免疫技术1966年Nakene和Pierce共同发表了《酶标抗体:制备和抗原定位中的应用》首先提出了免疫酶技术的基本原理1971年Engvall和Perlmann发表《酶联免疫吸附试验测定IgG含量》一文使免疫酶技术成为一种实用的检测液体标本中微量物质的方法目前免疫酶技术已广泛用于免疫学微生物学寄生虫学等
实验四 酶联免疫法测定食品中黄曲霉毒素一实验目的了解ELISA的基本原理及其优缺点 掌握间接ELISA法的试验操作过程二实验原理酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay简称ELISA)是免疫酶技术的一种本方法测定的基础是抗原抗体反应微孔板包被有针对黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1AFB1)的特异性单克隆抗体加入黄曲霉毒素标准品(或样品溶液)及黄
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(1)利用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接(2)通过酶与底物产生颜色反应用于定量测定测定的对象可以是抗体也可以是抗原(2)间接法测定抗体A.????? 将抗原吸附于固相载体表面B.????? 加抗体 形成抗原-抗体复合物 C.????? 加酶标抗体D. 加底物测定底物的降解量抗体量 取酶标板加入100μL孔的抗原稀释液3各孔加入酶标单抗100μL孔阴性棕黄色蓝色黄色
酶联免疫吸附实验(ELISA)要点 免疫吸附剂 已包被抗原或抗体的固相载体在低温(28℃)干燥的条件下一般可保存6个月有些不完整的试盒仅供应包被用抗原或抗体检测人员需自行 包被以下简述固相载体和包被过程 固相载体 固相载体在ELISA测定过程中作为吸附剂和容器不参与化学反应可作ELISA中载体的材料很多最常用的是聚苯乙烯聚苯乙烯具有较 强的吸附蛋白质的性能抗体或蛋白质抗原吸附其上后仍保留
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