重组质粒的构建关键词: 重组质粒??? 构建?????????????????????????????????????????????? 重组质粒构建是常用的分子生物学手段其实只是最基本的方法一般一个星期同时构建三二个组质粒是没有问题的在国内先进的实验中也大都是由实验员搞定但是其中还是有些基本的技巧需要掌握在这里将我的心得分享于大家这也是我本人几年来一线工作时的经验积累以期能为谷友提供借鉴让大家在
重组质粒的构建、转化、筛选和鉴定实验目的:1 学习在实现DNA体外重组过程中,正确选择合适的载体和限制性内切酶并能对限制性核酸内切酶对载体和目的DNA进行切割,产生利于连接的合适末端。2 学习设计构建重组DNA分子的基本方法,掌握载体和外源目的DNA酶切的操作。3 学习利用T4DNA连接酶把酶切后的载体片段和外源目的DNA片段连接起来,构建体外DNA分子的技术,了解并掌握几种常用的连接方式。4
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hTERT shRNA表达质粒的构建及鉴定胡凡果1史玉荣2牛瑞芳2刘彤1只向成3(1 天津医科大学总医院普通外科 3000002天津医科大学附属肿瘤医院中心实验室3000003天津医科大学附属肿瘤医院乳腺三科 300000)通讯:只向成 [摘要] 目的 构建针对人端粒酶催化亚基hTERT的shRNA表达质粒并加以鉴定 方法 以具有G418抗性的pBAsi-hU6-Neo(BamHI
一,引物设计:1,选择合适的载体。酶切位点及其顺序(酶切位点的顺序一定不能颠倒)。2,在NCBI上再次确认目的片段的碱基序列。1,首位20个碱基保护碱基4个上游酶切位点使用word排除目的片段里含有的酶切位点,最后确定所使用的酶。2,设计引物:primer-up: -- -------末尾20个碱基的反向互补碱基保护碱基4个下游酶切位点Primer-down:----- ------3,核对--
重组质粒的连接、转化及筛选概述 质粒具有稳定可靠和操作简便的优点。如果要克隆较小的DNA片段(<10kb)且结构简单,质粒要比其它任何 载体都要好。在质粒 载体上进行克隆,从原理上说是很简单的,先用限制性内切酶切割质粒DNA和目的DNA片段, 然后体外使两者相连接, 再用所得到重组质粒转化细菌,即可完成。但在实际工作中, 如何区分插入有外源DNA的重组质粒和无插入而自身环化的
重组质粒的连接、转化及筛选概述 质粒具有稳定可靠和操作简便的优点。如果要克隆较小的DNA片段(<10kb)且结构简单,质粒要比其它任何 载体都要好。在质粒 载体上进行克隆,从原理上说是很简单的,先用限制性内切酶切割质粒DNA和目的DNA片段, 然后体外使两者相连接, 再用所得到重组质粒转化细菌,即可完成。但在实际工作中, 如何区分插入有外源DNA的重组质粒和无插入而自身环化的
构成物质的微粒 讲师:韩向飞考点透视必备技能考点一构成物质的粒子 分子、原子、离子考点突破【注意】 考点二粒子的性质 考点三原子结构 考点四核外电子的排布原子和离子的核外电子是分层排布的,可以用结构示意图表示。如氧原子的结构示意图如图所示。 (2)最外层电子数为___个(只有一层时为___个)时,是一种相对稳定结构。考点五相对原子质量 【注意】 典例精析 类型一 物质的构成 【方法点拨】类
构成物质的微粒教学内容:构成物质的微粒二学习目标:1知道物质由分子原子或离子等微粒构成微粒是不断运动的2认识原子的内部结构3了解原子的结构模型及其在历史上的发展过程体验建立模型的思想三重难点讲解: 【知识点1】 物质由微粒构成 (难点) 物质是由分子原子离子等微粒构成的微粒是在不停地运动的1观察微粒的运动实验(物质的溶解蒸发和扩散现象)2应用:解释
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