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DNA的亚克隆综合实验方案班级:生物科学1班 :魏小笛 :108012011087一实验学时:3?二实验类型:综合性实验?三实验要求:必修?四实验目的对已经获得的目的DNA片段进行重新克隆其目的在于对目的DNA进行进一步分析或者进行重组改造等五实验内容(1)目的DNA片段和载体的制备(2)目的DNA片段和载体的连接(3)连接产物的转化(4)重组子筛选六实验过程一目的DN
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级第1章 DNA重组克隆的单元操作 1作为一个理想的载体应具备以下条件: (1)能够在宿主细胞中存在并繁殖有功能良好的复制子和启动子使插入基因复制和表达(2)具有多个限制性内切酶的切点且切点是单一的这样可将多个外源DNA片段插入其中(3)具有容易检测的筛选标记(4)载体DNA的分子量适当可容纳较大的外源DNA片段又可
10 分子克隆技术实验操作手册2005生命科学技术学院简介分子克隆技术是指DNA的无性繁殖技术。分子克隆技术课程主要是针对生物技术专业、生物科学专业、生命科学与技术基地班本科生及生物学类专业研究生而开设的实验课。实验内容涉及分子克隆的一些基本方法及基本操作技巧,主要包括分子克隆和分子杂交两大部分:分子克隆技术:DNA重组技术是分子生物学的核心内容。本实验利用质粒载体克隆外源DNA片段,通过这个
实验七重组DNA分子的转化 一、实验目的掌握将外源DNA分子导入感受态细胞的技术二、实验原理转化是指某一细胞系由于接受了外源DNA,而导致其原来的遗传性状发生改变,这种遗传性状包括遗传型与表型的改变。 三、实验材料水浴锅、离心机、超净工作台、恒温培养箱、各式移液器、培养皿;LB液体培养基、LB固体培养基、氨苄青霉素。DNA样品:重组DNA分子pCR21-Rv1791。四、实验步骤①5μl连接产物加
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农业生物技术学报
连接经验分享来源:.ggene:基因时代时间:08-07-13 点击: 做了快一年的分子克隆犯了很多错误经历了很多坎坷也学到了很多东西分子克隆过程中出现问题最多的大概就是连接了大家抱怨的也最多我也陷入在个步骤上很久经过长时间的摸索我在连接这个问题上有一些体会在这里跟大家分享一下我的经验以供和我一样陷入困境及刚开始做克隆的同学参考关于连接的提问多集中在连接的体系DNA的用量ve
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级细胞重组与克隆技术细胞拆合:把完整细胞的细胞核与细胞质用特殊的方法分离开来或把细胞核从细胞质中吸取出来或用紫外线等把细胞中的核杀死然后再把同种或异种的细胞核和细胞质重新组合起来培育新的细胞或新的生物个体 细胞重组:细胞融合技术与细胞核质分离技术结合在融合介质作用下使胞质体与完整细胞合并重新构成胞质杂种细胞的过程 8.1细胞重组
DNA重组实验中常用的技术一质粒DNA的提取及鉴定 (一)质粒DNA的提取及鉴定 1.收获细菌 (1)将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到通气良好的15ml的试管中接入一单菌落于37℃剧烈振荡培养过夜 (2)将培养物倒入 HYPERLINK =7typeid=88 t _blank 离心管中用台式离心机于4℃以12000g离心5min将剩余的培养物贮存于4℃ (3)吸
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