单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级基因操作的工具1基因工程的指 限制性核酸内切酶 主要存在于微生物一种限切酶只能识别一种特定的核苷酸序列并在特定切点切割DNA分子已发现的有200多种种类:来源:特点: 作用于:磷酸二酯键限制性内切酶(EcoRⅠ)作用过程点击播放 被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端思考:形成的黏性末端不同不同的限制酶呢具
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级什么叫基因工程基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术该技术是在生物体外通过对DNA分子进行人工剪切和拼接对生物的基因进行改造和重新组合然后导入受体细胞内进行无性繁殖使重组基因在受体细胞内表达产生出人类所需要的基因产物基因工程的概念基因工程的别名操作环境操作对象操作水平基本过程实质结果基因拼接技术或DNA重组技术生物体外基因D
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胰岛素基因工程的别名实质→ 拼接 苏云金芽孢杆菌含有一种可以合成毒蛋白的基因 让细菌的毒蛋白基因在棉花细胞中表达可培育出抵抗棉铃虫害的抗虫棉想一想需要做哪些关键工作提取抗虫基因与运载体DNA缝合关键步骤三:⒈主要来源:2.作用特点(特异性)3.作用位点4.作用结果:催化磷酸二酯键形成DNA连接酶还可把平末端之间的缝隙缝合起来但效率较低 ⑷目的基因有没有进入受体细胞如何去发现
基因表达载体的构建是基因工程的核心其中心内容是使目的基因与运载体结合形成重组运载体最后通过重组运载体将目的基因导入受体细胞 受体细胞知识点四 目的基因的监测与鉴定
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单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级①不能转录为信使RNA不能 编码蛋白质:能转录相应的信使RNA能 编码蛋白质 编码区非编码区原核细胞的 基因结构②有调控遗传信息表达的核 苷酸序列在该序列中 最重要的是位于编码区上 游的RNA聚合酶结合位点非编码区非编码区编码区编码区上游 编码区下游 启动子终止子真核细胞的基因结构编码区非编码区非编码区与RNA
连接黏性末端连接DNA链合成新的DNA分子无部分基因可以逆转录酶原理酶植物细胞原核细胞或酵母菌基因人酪氨酸酶知识综合应用重点提示 通过抗虫作物培育过程的有关基因工程知识的考查提升综合运用所学知识解决自然界和社会生活中有关生物学问题的能力典例分析 (2009·江苏卷34)苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀 虫能力的毒素蛋白下图是转Bt毒素蛋白基因植 物的培育过程示意图(ampr为抗氨苄青霉素
提取目的基因目的基因与运载体结合将目的基因导入受体细胞目的基因的表达和检测基因文库 基因文库的构建模式图PCR:聚合酶链式反应:是以DNA变性复制的某些特性为原理设计的 前提条件是必须对目的基因有一定的了解需要设计引物 DUCK179制作调节基 因启动子复制原点启动子目的基因终止子标记基因1分子水平的检测:分子杂交技术2个体生物学水平的签定练习练习
有了目的基因才能赋予一种生物以另一种生物的遗传特性(一)目的基因:(二)获取方法:逆转录酶根据已知的氨基酸序列合成DNA:2. 部分基因文库提取某生物全部DNADNA聚合酶非编码区非编码区编码区上游 :有调控作用的核苷酸序列 包括位于编码区上游的RNA 聚合酶结合位点(启动子)非编码②原理:__________指数c延伸(70℃-75℃):在Taq酶的作用下合成与模板互补的________ ②
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