ELISA试剂配制及实验流程ELISA是酶联接免疫吸附剂测定(( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称以双抗体夹心法举例说明试剂配制: (1) 包被缓冲液(PH9.6 0.2 0.05M 碳酸盐缓冲液): Na2CO31.59g NaHCO3 2.93g 加蒸馏水至1000ml(用时稀释成1x
ELISA试剂及溶液配制①包被液:0.05molL碳酸盐缓冲液(pH9.6)0.75g碳酸钠1.46g碳酸氢钠加去离子水定容至500ml②0.02molL磷酸盐缓冲液(pH7.4)0.2g磷酸二氢钾2.90g磷酸氢二钠8g氯化钠加去离子水定容到1000ml③抗体稀释液:0.02molL PBS(pH7.4)0.2BSA0.2gBSA加配好的0.02molL磷酸盐缓冲液溶解定量至100g④封闭
实验室常用试剂缓冲液的配制方法蛋白质电泳相关试剂缓冲液的配制方法核酸电泳相关试剂缓冲液的配制方法核酸蛋白质杂交用相关试剂缓冲液的配制方法SDS-PAGE分离胶配方表PAGE凝胶配方表(核酸电泳用)各种缓冲液的性质对照表离心机转子的转速与相对离心力RCF(g)间的换算关系相对离心力RCF值(g值)取决于转子的转速(rpm)和旋转半径(r以mm计算)可用如下公式表示:此外根据RCF值(g值)rpm值r
ELISA基本步骤和主要试剂材料注意:本步骤为间接ELISA步骤一 主要步骤1 包被取所要包被的物质提前设计好所需浓度根据包被孔数计算所需包被物的量用包被液稀释至所需体积分加至各孔中包被条件:两种选择:一是将ELISA板直接置4℃过夜也可以先置37℃孵育2小时再转入4℃过夜2 洗涤 包被结束后弃掉包被液用PBST进行洗涤方法为PBST加满每孔静置5-10min弃掉洗液重新加满重复洗涤3
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级ELISA试剂的选用和质检 卫生部临床检验中心王露楠影响试剂盒质量的因素试剂盒的选用试剂盒的质检方法目前试剂盒存在的问题影响试剂盒质量的因素1.原材料(1)固相材料 商品ELISA试剂盒中基本上都使用聚苯烯塑料微孔板其对ELISA试剂盒的影响在于孔间的显色差异(2)抗原 --自然抗原合成抗原和基因重组抗原纯 度:
Western Blotting试验试剂配制 (10mmolL)PMSF PMSF 异丙醇 100ml 溶解后分装于离心管中-20℃保存 (神经毒注意防护)10SDS SDS 10g 蒸馏水至 100ml 50℃水浴下溶解室温保存如在长期保存中出现沉淀水浴溶化后仍可使用 10过硫酸胺(AP) 过硫酸胺 1g 超纯水 10ml 溶解后分装于200
ELISA ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术此项技术自70年代初问世以来发展十分迅速目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域 (一) 原理ELISA是以免疫学反应为基础将抗原抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术
试剂碳酸盐包被缓冲液: 3.03g Na2CO3 6.0g NaHCO3 溶解于900ml双蒸水中检测并调整pH至9.6定容至1L PBS:1.16 g Na2HPO4 0.1 g KCl 0.1 g K3PO4 4.0 g NaCl 溶于500mL 蒸馏水中调整pH至7.4 封闭液:溶于PBS的1 BSA HYPERLINK :.labomereviewreagent
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