Western Blotting朱羽桐(生物学基地班)摘要: Western Blotting是将经电泳分离后的蛋白质转移并固定在化学合成膜(常用的是硝酸纤维素膜和尼龙膜)的支持物上然后以特定的亲和反应免疫反应或结合反应以及显色系统分析此印迹此法用于检测材料中某种蛋白质的相对含量本实验采用人血清为材料对此样品进行SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后用电转移法将蛋白质转印到硝酸纤维素薄膜
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一种含有R-pGEX-4T-1质粒上特定基因片段(R基因)的重组质粒的构建与表达摘要:利用碱裂解法提取大肠杆菌DH5α中R-pGEX-4T-1质粒并通过琼脂凝胶电泳和双酶切两种方法鉴定检测提取质粒的结果琼脂凝胶电泳的结果说明了已提取出约为4600bp的环状质粒DNA片段双酶切的结果说明了该质粒含有特定基因片段——R基因根据及分子生物学软件设计出一对特异性引物用于扩增R基因将PCR扩增出来的R基
Western Bloting (张雪雁)操作步骤:做胶:下层胶一块以水或乙醇隔离空气待下层胶凝固后做上层胶每块胶配置3ml灌胶插梳子赶走气泡蛋白变性:在胶凝固过程中变性蛋白质蛋白质的上样量按事先所测弄浓度计算准确分装到EP管或按5ul100ul样品的浓度加β—巯基乙醇然后以PCR仪95℃变性10分钟上样电泳:上层胶为安全凝固(大约15分钟)后两只手同时向上用力取下梳子以蒸馏水仔细清洗各泳道内残
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高级生物化学与分子生物学综合实验报告 实验目的以特定酶基因在大肠杆菌中的克隆表达和纯化为主线进行基因操作蛋白质表达亲和层析纯化等的训练通过集中训练熟练生物化学和分子生物学实验操作为独立开展研究生课题研究奠定实验基础 实验原理利用基因重组技术将目的基因与载体质粒DNA在体外进行重组然后把这种重组DNA转化到感受态细胞通过一定的诱导条件使之在受体细胞内增值表达相应的目标蛋白为了得到相应的目标蛋白需要通
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