单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级第二节 蛋白质的分离纯化?一蛋白质分离提纯的一般原则高纯度高活性高回收率二蛋白质的分离方法1.透析(dialysis)和超滤(ultrafiltration)半透膜 (玻璃纸火棉纸) 透析常用于蛋白质溶液的除盐超滤常用于蛋白质溶液的除盐浓缩(一)根据分子大小不同的分离方法2. 密度梯度离心(density gradient

单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级蛋白质分离技术-电泳上海交通大学医学院倪培华 副教授概 述凝胶电泳：由琼脂琼脂糖淀粉胶及聚丙烯酰胺等物质作支持体的电泳特点：1.可以制成非常均匀的凝胶带电质点在凝胶的孔中泳动2. 电泳操作方法简便电泳速度快3. 分辨率高重复性好电泳图谱清晰4. 适用于生化免疫等定性定量测定 琼脂糖凝胶天然琼脂(agar):又名琼胶菜燕冻

单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级蛋白质的分离提取SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及Western印迹蛋白质的分离提取蛋白质分子在水溶液中因其表面带有一定数量的电荷及形成水化膜使其成为稳定的胶体颗粒在某些物理或化学因素影响下蛋白质颗粒由于失去电荷和水化膜而沉淀中性盐重金属盐三氯乙酸和乙醇等都是常用的沉淀蛋白质的试剂 Ⅰ蛋白质的盐析大量中性盐类如硫酸铵(NH4)2SO

凝胶电泳的实验原理6 q E u6 R B U6 　　聚丙烯酰胺凝胶电泳普遍用于分离蛋白质及较小分子的核酸琼脂糖凝胶孔径较大适用于分离同工酶及其亚型大分子核酸等应用较广琼脂糖和聚丙烯酰胺可以制成各种形状大小和孔隙度琼脂糖凝胶分离DNA片度大小范围较广不同浓度琼脂糖凝胶可分离长度从200bp至近50kb的DNA片段琼脂糖通常用水平装置在强度和方向恒定的电场下电泳聚丙烯酰胺分离小片段DNA(5

按一下以編輯母片標題樣式按一下以編輯母片第二層第三層第四層第五層FPLC (Fast Protein Liquid Chromatography)銘傳大學 生物科技學系儀器外觀 此為FPLC外觀FP可解釋為Fast protein液相層析或是Fast performance液相層析原理同HPLC皆是作分離之用不同的是它不用HPLC高壓推動壓力較低且更注重純化收集廣泛適用於蛋白質的分離純化層

单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级202242蛋白质的提取和分离能从成千上万种蛋白质混合物中纯化出一种蛋白质的原因是不同蛋白质在许多理化性质上有着极大的不同这些理化性质的不同是由于氨基酸的数目和序列不同造成的蛋白分离的方法基本知识与蛋白质分离相关的理化特性分子大小分子形状带电特性溶解特性与

单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级目标蛋白质快速分离系统(PF 2D) 蛋白质组学(Proteomics)研究特定组织细胞生物系统中全部蛋白质的结构和功能及其相互关系发现寻找新的目标蛋白诊断标记物药物靶标

A Brief View of Protein Purification>>>A Brief View ofProtein Purification概 述? 蛋白质的分离纯化是研究蛋白质结构化学组成和生物功能的基础蛋白质在自然界中存在于复杂的混合体系中而且许多重要的蛋白质在细胞中的含量极低 要把蛋白质从复杂的体系中分离出来同时又要防止其组成结构的改变和生物活性的丧失显然是有相当难度的概 述细胞

单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式蛋白质的分离纯化第一节 能用作纯化依据的蛋白质性质第二节 蛋白质分离纯化的一般步骤第三节 蛋白质的分离纯化方法分离纯化蛋白质的目的: ①将蛋白质和非蛋白质杂质分离 ②将不同的蛋白质相互分离分离提纯蛋白质的要求：(1)纯度 (2)活性 (3)得率 (4)速度第一节 能用作纯化依据的蛋白质性质1

单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级1蛋白质的分离纯化和表征第 7 章P291一蛋白质的酸碱性质 蛋白质分子中有很多酸性和碱性解离基团是具有两性解离性质的化合物各种解离基团的解离度与溶液的pH有关pH越低碱性解离度越大蛋白质分子带正电荷越多负电荷越少pH升高则解离情况相反