单击此处编辑母版样式单击此处编辑幻灯片母版样式第二层第三层第四层第五层色谱法的基本原理(ASF)色谱法是一种分离分析方法 分离原理: 混合物中各组分在两相间(固定相和流动相)进行分配当流动相中所含混合物经过固定相时就会与固定相发生作用由于各组分在性质和结构上的差异与固定相发生作用的大小强弱也有差异固此在同一推动力作用下不同组分在固定相中滞留时间有长有短从而按先后不同次序从固定相中流出
第20章高效液相色谱法 概述 高效液相色谱法:以经典液相色谱为基础,在气相色谱实验和技术基础上建立的一种液相色谱法一、HPLC与经典LC区别二、HPLC与GC差别三、高效液相色谱仪流程图四、特点一、HPLC与经典LC区别主要区别:固定相,输液设备和检测手段1.经典LC:仅做为一种分离手段 柱内径1~3cm,固定相粒径100μm 且不均匀 常压输送流动相柱效低(H↑,n↓) 分析周期长 无法在线检测
第20章高效液相色谱法 概述 高效液相色谱法:以经典液相色谱为基础,在气相色谱实验和技术基础上建立的一种液相色谱法一、HPLC与经典LC区别二、HPLC与GC差别三、高效液相色谱仪流程图四、特点一、HPLC与经典LC区别主要区别:固定相,输液设备和检测手段1.经典LC:仅做为一种分离手段 柱内径1~3cm,固定相粒径100μm 且不均匀 常压输送流动相柱效低(H↑,n↓) 分析周期长 无法在线检测
??? ?? ??? ????? ??? ???? ??????? ???? ???? ????? ??Tanghui.pha.shzu高效液相色谱法High Performance Liquid ChromatographyHPLC 高效液相色谱法(HPLC)是20世纪60年代末70年代初发展起来的一种新型分离分析技术随着不断改进与发展目前已成为应用极为广泛的化学分离分析的重
检测器低可以敏感A2S1 S2 由于2-甲基丁基-14-二醇不仅缺乏必要的吸收基团而且不能在OB柱拆分应采用苯甲酰氯将其衍生为2-甲基丁基-14-二醇二苯甲酸酯后才能进行分离测定 蒸发光散射质量检测器(Evaporative Light-Scatting Mass Detector ELSD)蒸发流动相S 在硅胶吸附色谱中 对相对保留值和分离选择性起主导作用的是溶质与固定相的作用 流动
高效液相色谱法的主要类型与原理(一)正相键合相色谱法 固定相的极性大于流动相的极性 固定相-氨丙基氰丙基 流动相-以正己烷为底剂加入极性调节剂2.流动相的极性与保留因子的关系 极性强的组分的保留因子k 小先洗脱出柱流动相的极性增强洗脱能力减弱使组分 k 增大tR 增大反之k 减小 tR 减小1.分离机制 以RPIC分离碱类物质为例用离子对模式说明
吸附色谱库仑力蛋白酶抗体分离生物和医药分析2进样系统通常采用六通伐进样:3色谱柱(1)紫外-可见检测器荧光检测器结构示意图键合固定相非极性键合固定相: 键合在载体表面的功能分子是烷基苯基等非极性有机分子如最常用的ODS(Octa Decyltrichloro Silane)柱或C18柱就是最典型的代表其极性很小极性键合固定相: 键合在载体表面的功能分子是具有二醇基醚基氰基氨基等极性基团的有机分子
第17章高效液相色谱171 概述172 HPLC仪器 包括: 高压输液装置; 进样系统; 分离系统; 检测系统;辅助系统173 流动相和固定相简介174 高效液相色谱方法各论分配色谱、吸附色谱、离子交换色谱、尺寸排阻色谱和亲和色谱171 概述 高效液相色谱(HPLC)是以溶剂液体为流动相的色谱方法。按照固定相不同可分为:液液分配色谱;吸附色谱(液固色谱);离子交换色谱;尺寸排阻色谱(凝胶渗透色谱)
1.学习高效液相色谱仪的操作2. 了解用反相液相色谱法分离芳香 烃的基本原理3. 掌握用反相液相色谱法分离芳香 烃类化合物高效液相色谱仪三大主要部件:紫外检测器高压输液泵色谱柱流动相:80甲醇20水试剂:甲苯苯n-丙基苯 n-丁基苯(均为分析级)未知样本
进样器
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