动物基因组DNA的分离实验目的:通过本实验了解并掌握提取基因组DNA的原理和步骤分离纯化核酸总的原则: ①应保证核酸一级结构的完整性 ②排除其它分子的污染核酸纯化应达到的要求: ①核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子 ②排除其它核酸分子的污染 ③其它生物大分子的污染应降低到最低程度 DNA提取的基本步骤1.材料准备2.破碎细胞或包膜-内容物
动物基因组DNA的分离与核酸浓度的测定实验方法 先将小鼠肝脏进行预处理:断颈法处死一只小鼠采集肝脏组织用生理盐水清洗血污取一只小鼠的肝脏(约2g)加入20 mL匀浆缓冲液(STE buffer)用电动组织匀浆器匀浆至无明显组织块存在(最好冰浴操作)将组织细胞的匀浆液体转移至15 mL蓝盖离心管中4℃ 4000 rmin离心15 min弃上清留沉淀沉淀中加入6 mL消化缓冲液(含蛋白酶K)轻轻反转混
动物基因组DNA的提取[实验原理]??? 在EDTA和SDS等去污剂存在下,用蛋白酶K消化细胞,随后用酚抽提,可以得到哺乳动构基因组DNA,用此方法得到的DNA长度为100-150 kb,适用于L嘴菌体构建基因组文库和 Southern分析。????通过本实验了解并掌握提取基因组DNA的原理和步骤,以及相对分子质量较大的DNA的 琼脂糖凝胶电泳技术。[仪器、材料与试剂](一)仪器1台式离心机2
DNA (脱氧核糖核酸) 主要存在于细胞核的染色体中 核外也有少量DNA如线粒体DNA(mtDNA)叶绿体DNA(cpDNA)质粒DNA RNA(核糖核酸) 存在于细胞质中如mRNA rRNA tRNA等 除上述DNARNA外还有非细胞形式存在的病毒和噬菌体其或只含DNA或只含有RNA破碎组织细胞DNA的提取:苯酚抽提法采用吸附材料吸附的方式分离DNA时应提供相应的缓冲体系采用有机(酚氯
作用: 1.使蛋白质变性沉淀从核酸提取液中分离除去以防造成蛋白污染 2.使蛋白质变性故可使核糖体解聚释放出核酸 3.某些蛋白质变性剂也有抑制 RNase活性和破裂细胞的作用 提取1. 材料设备及试剂材料:冷冻或新鲜抗凝全血组织样设备:EP管微量取液器(20μl 200μl 1000μl) 台式高速离心机 涡旋振荡器试剂:裂解液 ligsis buffer(40mMT
核酸分离纯化原则原理:动物和植物组织的脱氧核糖核蛋白(DNP)可溶于水或浓盐溶液(如1molL氯化钠)但在氯化钠盐溶液中溶解度最低而核酸核蛋白(RNP)则在氯化钠中溶解度最大利用这一性质可将其分开方法:先用组织捣碎机将动物肝脏制成组织匀浆再用 氯化钠溶液把细胞中的 RNP 提取出来最后用酚将RNA和蛋白质分开地衣酚试剂材料:牛肝试剂: 氯化钠标准RNA溶液:100μgmL地衣酚(35-二羟基甲苯)
动物基因组DNA的提取[实验原理]??? 在EDTA和SDS等去污剂存在下,用蛋白酶K消化细胞,随后用酚抽提,可以得到哺乳动构基因组DNA,用此方法得到的DNA长度为100-150 kb,适用于L嘴菌体构建基因组文库和 Southern分析。????通过本实验了解并掌握提取基因组DNA的原理和步骤,以及相对分子质量较大的DNA的 琼脂糖凝胶电泳技术。[仪器、材料与试剂](一)仪器1台式离心机2
本科学生实验报告 陈明辉 学院 生命科学学院 专业 生物科学 班级08级A班 实验课程名称 分子生物学 指导教师及职称 倪娟老师 开课时间 2010至2011学年下学期云南师范大学教务处编印实验名称:哺乳动物组织基因组DNA提取Genomic DNA Extraction from Mammal Tissue实验时间:20
一实验目的 通过采用改进的SDS法提取植物叶片基因组DNA使学生学习和掌握从植物组织中提取DNA的方法和原理 二实验原理 基因组DNA的提取通常用于构建基因组文库Southern杂交RFLPPCR分离基因和分子标记分析等利用基因组DNA序列较长的特性可以将其与细胞器或质粒等小分子DNA分离加入一定量的异丙醇或乙醇大分子的基因组DNA形成沉淀而小分子DNA则附于管壁及管底通过离心方法即可将它们分离从
实 验 一 植物基因组DNA的提取 一实验目的: 1. 了解真核生物基因组DNA提取的一般 原理 2. 掌握DNA提取的方法和步骤 二一般原理 提取DNA的一般原理是将分散好的真核生物组织细胞在含SDS和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质再用酚:异戊醇抽提的方法去除蛋白质得到的DNA经乙醇沉淀或透析等方法进一步纯化三材料 玉
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