编号:2-5主题:RACE技术概述:近年来随着生物技术的不断发展,出现了许多克隆新基因的方法和手段,cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)是一种基于PCR从低丰度的转录本中快速扩增cDNA的5'和3'末端的有效方法,以其简单、快速、廉价等优势而受到越来越多的重视。目的:1可用于cDNA文库的构建及筛选。2应用RACE克隆已知片段的旁
编号:2-2主题:第二代DNA测序技术概述:第一代测序(缺点:通量低1000个核苷酸/反应,费用高)?化学降解法?双脱氧链终止法(Sanger法)?荧光自动测序技术?杂交测序技术高通量测序:第二代测序(next-generation sequencing,NGS)第二代测序技术的核心思想是边合成边测序(Sequencing by Synthesis),即通过捕捉新合成的末端的标记来确定DNA的序
编号:2-9主题:digital PCR概述:Digital PCR(dPCR)即数字PCR,它是一种核酸分子绝对定量技术。相较于qPCR,数字PCR可以直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量。数字PCR是最新的定量技术,基于单分子PCR方法来进行计数的核酸定量,是一种绝对定量的方法。由于数字PCR能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量,因此特别适用于依靠Real-tim
编号:2-1主题:RT-PCR概述:RT- PCR(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)即逆转录PCR,是将RNA的逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应(PCR)相结合的技术。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞/组织中基因表达水平,细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列等。目的:检测目的基因的转录产
编号:2-5主题:Real-Time PCR概述:Real-Time PCR 技术,又称实时定量荧光PCR(real-time quantitative PCR),是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行总量分析或通过Ct值对模板进行相对定量。实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems推出,该
3race5race技术服务一:简介cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends RACE)是通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术是基于PCR技术由已知的一段cDNA片段通过两端延伸扩增从而获得完整3和5端的方法无需构建cDNA文库可以短时间内获得目的基因cDNA序列以其简单快速廉价等优势而受到越来越多的重视主要应用于全长基因获取转录起始位点
编号:2-3主题:基因芯片 概述:基因芯片(又称 DNA 芯片、生物芯片)技术系指将大量(通常每平方厘米点阵密度高于 400 )探针分子固定于支持物上后与标记的样品分子进行杂交,通过检测每个探针分子的杂交信号强度进而获取样品分子的数量和序列信息。通俗地说,就是通过微加工技术 ,将数以万计、乃至百万计的特定序列的DNA片段(基因探针),有规律地排列固定于2cm2 的硅片、玻片 等支持物上,构成的一
编号:2-6主题:DNase I足迹试验概述:DNase I足迹法于1978年引入科研领域,其原理与DNA的化学测序法相似,首先将待测双链DNA片段中一条链的一端选择性地进行标记,然后加入适当浓度的DNaseI,使在DNA链上形成缺口,经过变性后电泳分离,放射自显影,即形成以相差一个核苷酸为梯度的DNA条带。但当DNA片段与相应的序列特异性DNA结合蛋白结合后,DNA结合蛋白可保护相应的DNA序
编号:3-5主题:荧光原位杂交技术(Fluorescence in situ hybridization, FISH)概述:原位杂交技术是以核酸分子碱基互补配对的原理为基础的实验技术。通过标记的核酸分子(探针,Probe)与目标核酸分子杂交,再用相应的方法检测探针的存在,从而揭示靶部位目标分子的位置。最早的原位杂交技术出现于 1969 年,Gall 和 Pardue 利用H3标记的核糖体 RNA
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