相关文档

• 亲和层析法纯化胰蛋白酶.ppt

  1. 4要求掌握的技术 柱层析技术 Sephadex G-25 分子筛层析 DEAE-Cellulose 离子交换层析 CHOM –Sepharose 4B 亲和层析 蛋白质提取技术 10TCA 提取鸡卵粘蛋白 乙酸pH 提取胰蛋白酶原

• 胰蛋白酶的催化机理.ppt

  CCChymotrypsin Catalytic Mechanism A2NNCC[NH2]OO[NH2]

• 凝胶层析法分离纯化蛋白质.ppt

  凝胶基质一凝胶的处理　　　Sephadex G-100干粉经蒸馏水室温充分溶胀48h或沸水浴中煮沸2h冷却至室温后抽真空脱去颗粒空隙中的空气

• 胰蛋白酶的制备.doc

  一猪胰蛋白酶制备（一）猪胰蛋白酶原的提取猪胰脏（新鲜的或杀后立即冷藏的）除去脂肪和结缔组织后绞碎 加入2倍体积预冷的乙酸酸化水（）于1015℃搅拌提取24小时四层纱 布过滤得乳白色滤液用 H2SO4调pH至放置34小时后用折迭 t _blank 滤纸过滤得黄色透明滤液（约升）加入固体硫酸铵（予先研细）使溶液达饱和度（每升滤液加492克）放置过 夜后抽滤（挤压干）得猪胰蛋白酶原粗制品（二）胰

• 胰蛋白酶活性测定.docx

  胰蛋白酶活性测定在动物胰脏中胰蛋白酶是以无活性的酶原状态存在的在生理条件下胰蛋白酶原随胰液分泌至十二指肠后在小肠上腔有Ca2的环境中为肠激酶或胰蛋白酶所激活其肽链?N?-端的赖氨酸与异亮氨酸之间的一个肽键被水解失去一个酸性6肽其分子构象发生一定的改变后转变为具有催化蛋白质水解活性的胰蛋白酶胰蛋白酶原分子量约为24?000其等电点为pH8.9胰蛋白酶的分子量约为23?400其等电点为pH?10

• 实验十__猪胰蛋白酶.doc

  实验十 猪胰蛋白酶的纯化及其活性测定一、实验目的1 学习胰蛋白酶的纯化及其结晶的基本方法。2 学习用紫外法测定酶活性，搞清酶活性与比活性的概念。二、实验原理胰蛋白酶是以无活性的酶原形式存在于动物胰脏中，在Ca2+的存在下，被肠激酶或有活性的胰蛋白酶自身激活，从肽链N端 赖氨酸和异亮氨酸残基之间的肽键断开，失去一段六肽，分子构象发生一定改变后转变为有活性的胰蛋白酶。胰蛋白酶原的分子量约为24000，

• 第四章_蛋白类酶的分离纯化.ppt

  酶提取酶分离纯化不同阶段机械破碎通过各种化学试剂对细胞膜的作用而使细胞破碎盐溶液提取可与水混溶的有机溶剂2离心分离分离原理选择一定的条件使酶液中存在的某些杂质变性沉淀而不影响所需的酶从而使酶与杂质分离密度梯度离心前用密度梯度混合器预先配制密度梯度系统贮液室与混合室的截面积关系决定梯度类型配制中将稀溶液置于贮液室B浓溶液置于混合室A 如图4-2(郭勇酶工程p96） 流出的梯度液经过导管小心收集于离心

• 大豆乳清蛋白胰蛋白酶改性工艺研究.ppt

  大豆乳清蛋白胰蛋白酶改性工艺研究2 水解时间对水解程度的影响

• 药用胰蛋白酶的制备.doc

  药用胰蛋白酶的制备实验目的掌握制备胰蛋白酶的原理掌握离子交换法提取生化药物的步骤实验原理胰蛋白酶是以无活性的酶原形式存在于动物胰脏中在Ca2的存在下被肠激酶或有活性的胰蛋白酶自身激活从肽链N端 赖氨酸和异亮氨酸残基之间的肽键断开失去一段六肽分子构象发生一定改变后转变为有活性的胰蛋白酶胰蛋白酶原的分子量约为24000其等电点约为胰蛋白酶的分子量与其酶原接近(23300)其等电点约为最适在pH=

• 亲和柱层析操作（可溶性蛋白）.doc

  亲和柱层析操作规程（可溶性蛋白）1.装柱： 取出层析柱用去离子水冲洗干净连接好管子后固定柱子用水冲洗层析柱3-5次每次10ml去离子水取出填料静止至室温后根据需要用移液器取出3-5ml的填料进行装柱用去离子水冲洗填料5个柱体积2.柱的平衡与上样：用 PB bufferA 缓冲液()平衡Ni柱直至流出液的pH为对处理的样品进行过滤后缓慢上样让蛋白充分结合3洗杂蛋白：用 PB bufferA 缓冲液(