第六章基因的分离与鉴定基因的分离与鉴定方法 真核生物基因克隆的实例染色体自主复制顺序的分离与鉴定着丝粒DNA的分离与鉴定端粒DNA的分离与鉴定?第一节基因的分离与鉴定方法一,获得基因的一般方法1化学合成法主要用于较小基因合成,或需改变密码子的基因。2半化学合成法mRNA→cDNA →加人工接头/合成一段DNA →与载体相连3筛选法用于各种方法从基因组文库中选择目的基因。4采用PCR技术从基因组或总
定小结复习: 基因分离定律的实质是什么粒色黄色皱粒3 y黄色圆粒RRYy3 r rYRyRY Y基因型比: ( 9种 )yrYYRryyRr 1 : 1 : 1 : 1黄色圆粒豌豆与绿色皱粒豌豆的F1测交试验结果 31不同性状的数量比 测交实验的结果符合预期的设想因此可以证明上述对两对相对性状的
单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式蛋白质的分离纯化第一节 能用作纯化依据的蛋白质性质第二节 蛋白质分离纯化的一般步骤第三节 蛋白质的分离纯化方法分离纯化蛋白质的目的: ①将蛋白质和非蛋白质杂质分离 ②将不同的蛋白质相互分离分离提纯蛋白质的要求:(1)纯度 (2)活性 (3)得率 (4)速度第一节 能用作纯化依据的蛋白质性质1
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级第一节 基因的分离定理第三章现代遗传学之父奥国人修道士1851进修自然科学和数学三年后进行多种植物的杂交试验1865《植物杂交试验》提出了分离定律和自由组合定律1900成果才受到科学界的重视和公认一孟德尔的豌豆杂交试验1. 孟德尔为什么选择豌豆作为试验材料2.豌豆人工杂交试验是如何做的1自花传粉 闭花受粉自然状态下永远是纯
显性基因导致♂7)杂种子一代:一对相对性状的杂交实验3 ∶ 1 杂种个体减数分裂形成配子时等位基因随着同源染色体分开而分开
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二真核生物基因的组成2.构建基因组文库的基本步骤 为了最大限度地保证基因在克隆过程中的完整性 用于基因组文库构建的DNA在分离纯化操作中应尽量避免过度的断裂制备的DNA分子量越大经切割处理后样品中含有不规则末端的DNA片段的比率就越低重组率和完备性也就越高原理:以第一链合成产物cDNA:mRNA杂交体作 为切口平移的模板RNA酶H在杂交体的
一)黏性末端DNA分子间的连接 在DNA片段上某一酶切口处换成另一种酶切口5 P-3 5突出的末端 外源片段先用Klenow补平然后用TdT补加polyC载体片段也用Klenow补平加polyG退火不经连接即可转化目的是:不使酶切位点遭受破坏 ployG退火用化学合成法合成的一段10-12bp的特定限制性内切酶识别位点序列的平端双链1978年康内尔大学的吴瑞教授发明Blunt-en
第 六 章 基因操作中大分子的分离和分析◆当以的KAc高盐缓冲液调节其pH至中性时变性的质粒DNA又恢复原来的构型保存在溶液中而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构◆通过离心染色体DNA与不稳定的大分子RNA蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去②NaOH-SDS液:NaOH浓度为 molL加抽提液时该系统的pH就高达因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性SDS是离子型表面活性剂它可以溶解
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级遗传的基本规律 一基因的分离定律基因的分离定律问题1:遗传性状由什么控制呢问题2:现代遗传学认为生物性状是由基因控制的基因在DNA上肉眼看不见如何研究性状会不会直接遗传呢=不高不矮融合遗传理论:遗传因子或遗传物质相遇的时候彼此会相互混合相互融化而成为中间类型的东西白人和黑人结合后代是混血儿马和驴产生骡高矮到底遗传有没有规律呢孟
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