全血基因组DNA提取地中海贫血基因检测概述地中海贫血是由于某类珠蛋白合成受抑制所引起的溶血性贫血。地中海贫血主要分为α-地中海贫血和β-地中海贫血。α-地中海贫血基因诊断操作流程β-地中海贫血基因诊断操作流程实验目的1 掌握离心柱法提取全血DNA的检测方法2 了解DNA浓度及纯度的检测实 验 原 理(离心柱法)独特的缓冲液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,使蛋白与DNA分离,然后基因组DN
实验2 全血基因组DNA的提取原理:由于血液各组成成分颗粒大小及比重的不同利用明胶的吸附作用使红细胞沉降在管底从而与白细胞分离通过SDS的破膜(细胞膜和核膜)作用使白细胞释放出DNA然后利用酚和氯仿抽提纯化分离除去蛋白质最后用乙醇沉淀析出DNA材料:方法:1.提取WBC(1)取1ml全血(EDTA抗凝)加入等体积( 1ml )3的明胶盖紧后颠倒混匀37℃水浴静置5-10分钟
小麦基因组DNA的提取1“S” Buffer提取法采用Sharp等(1989)提出并经Devos等(1992)改进的酚-氯仿提取法。步骤如下:(1)取2ml离心管编号后放到离心管架上,每个离心管中放一颗直径约5mm的不锈钢珠,每个小麦样品取约50mg叶片剪成小段后放入相应的离心管中并盖上盖。(2)将放有离心管的离心管架放入液氮中速冻,没有什么响声后取出,用专用的两个盖子夹好后,放在Mixer
一实验目的 通过采用改进的SDS法提取植物叶片基因组DNA使学生学习和掌握从植物组织中提取DNA的方法和原理 二实验原理 基因组DNA的提取通常用于构建基因组文库Southern杂交RFLPPCR分离基因和分子标记分析等利用基因组DNA序列较长的特性可以将其与细胞器或质粒等小分子DNA分离加入一定量的异丙醇或乙醇大分子的基因组DNA形成沉淀而小分子DNA则附于管壁及管底通过离心方法即可将它们分离从
动物基因组DNA的提取[实验原理]??? 在EDTA和SDS等去污剂存在下,用蛋白酶K消化细胞,随后用酚抽提,可以得到哺乳动构基因组DNA,用此方法得到的DNA长度为100-150 kb,适用于L嘴菌体构建基因组文库和 Southern分析。????通过本实验了解并掌握提取基因组DNA的原理和步骤,以及相对分子质量较大的DNA的 琼脂糖凝胶电泳技术。[仪器、材料与试剂](一)仪器1台式离心机2
DNA (脱氧核糖核酸) 主要存在于细胞核的染色体中 核外也有少量DNA如线粒体DNA(mtDNA)叶绿体DNA(cpDNA)质粒DNA RNA(核糖核酸) 存在于细胞质中如mRNA rRNA tRNA等 除上述DNARNA外还有非细胞形式存在的病毒和噬菌体其或只含DNA或只含有RNA破碎组织细胞DNA的提取:苯酚抽提法采用吸附材料吸附的方式分离DNA时应提供相应的缓冲体系采用有机(酚氯
作用: 1.使蛋白质变性沉淀从核酸提取液中分离除去以防造成蛋白污染 2.使蛋白质变性故可使核糖体解聚释放出核酸 3.某些蛋白质变性剂也有抑制 RNase活性和破裂细胞的作用 提取1. 材料设备及试剂材料:冷冻或新鲜抗凝全血组织样设备:EP管微量取液器(20μl 200μl 1000μl) 台式高速离心机 涡旋振荡器试剂:裂解液 ligsis buffer(40mMT
植物基因组植物基因组DNADNA
动物基因组DNA的提取[实验原理]??? 在EDTA和SDS等去污剂存在下,用蛋白酶K消化细胞,随后用酚抽提,可以得到哺乳动构基因组DNA,用此方法得到的DNA长度为100-150 kb,适用于L嘴菌体构建基因组文库和 Southern分析。????通过本实验了解并掌握提取基因组DNA的原理和步骤,以及相对分子质量较大的DNA的 琼脂糖凝胶电泳技术。[仪器、材料与试剂](一)仪器1台式离心机2
Single-tube LiOAc-SDS lysis(1)Single-tube LiOAc-SDS lysis Single yeast colonies (or cells collected from 100 μL liquid YPD culture, OD600= 04) were suspended in 100 μL 200 mM lithium acetate (LiOAc)
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