DNA荧光染色法检测细胞培养中的支原体污染原理:利用荧光染料(bisbenzimideHoechst33258)检测支原体污染这种染料会结合到DNA的A-T福集区域因为支原体的DNA中A-T含量高(55-80)所以可将其染色而检测被支原体污染的细胞经染色后在细胞核外与细胞周围可看到许多大小均一的荧光小点即为支原体的DNA证明有支原体污染特点:简单经济与灵敏广泛使用可作为例行的检测手段可以检测不易培
细胞支原体污染的荧光检测方法DNA荧光染色法: 1.原理:利用荧光染剂(bisbenzimide Hoechst 33258)侦测支原体污染此染剂会结合到DNA之Adenosine-Thymidine (A-T) rich区域因为支原体之DNA中A-T含量占多数(5580)所以可将其染色而侦测被支原体污染之细胞经染色后在细胞核外与细胞周围可看到许多大小均一之荧光小点即为支原体之DNA证明有支原体之
细胞支原体污染的PCR检测支原体菌株来源: ???????ATCC23838?精氨酸支原体 ??????发酵支原体 ??????唾液支原体 ??????人型支原体 ??????口腔支原体 ??????猪鼻支原体 ?????? 其共同引物序列来自16s和23s保守区域 外部引物为F1?5′-ACACCATGGGAGCTGGTAAT-3′ ??????????R1?5′-GTTCATCGACTTTCA
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级2011-12-17?? 支原体污染及防治从门外汉角度谈—11支原体污染易被忽视1.培养液可不发生混浊2.细胞病理变化轻微或不显著3.细微变化也可由于传代换液而缓解4.个别严重者可致细胞增殖缓慢甚至从培养器皿脱落22支原体高污染率国内外研究表明在细胞培养中支原体感染率达到30-60支原体污染已成为世界问题3333333
细胞支原体污染一般情况及预防措施 =25typeid=297 t _blank 细胞株若受到细菌真菌支原体或是特定病毒等之污染时会严重的影响实验的结果而细菌真菌等之微生物污染时较易自培养基等的外观变化察觉但是若受到支原体之污染时细胞之外观较无明显变化但是其污染会造成细胞之生长速率缓慢细胞产生病变之型态改变等等变化各国细胞库支原体污染的统计表如下:国家 ?? 受支原体污染()?? 报告年度US
细胞培养中的支原体污染的预防及处理ztwpierr… Mycoplasma国内主要有三种译名医学文献译为支原体(分枝原体枝原体类菌质体)动物医学文献译为霉形体或支原体台湾香港则译为微浆菌 支原体是目前已知一类能在无生命培养基上生长繁殖的最小的原核细胞型微生物自然界分布广泛种类多有80余种分为两个属:一为支原体属(Mycoplasma)有几十个种另一为脲原体属(Ureaplasma)仅有一种与人类感
胞培养中的污染分为两类化学污染和生物污染化学污染 化学污染是一些对细胞有毒性的或对细胞产生刺激的化学物质这些污染一般来自于没有洗净的器皿不纯的化学试剂和质量较差的蒸馏水等 化学污染中比较引人注意的是细菌内毒素它是革兰氏阴性细菌细胞死亡后解体释放出的疏水性的细胞壁组成物质对塑料等疏水性强的物质有很强的吸附能力细菌内毒素可刺激部分细胞产生一些激素或细胞因子对细胞生长和实验结果产生影响细菌内毒
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细胞污染鉴别与图片细菌培养液是被洋葱佰克霍尔德菌污染了洋葱佰克霍尔德菌(Burkholderiacepacia)原属假单胞菌属是植物病原菌因引起洋葱患病而得名是医院感染病原菌之一 洋葱伯克霍尔德菌是一种广泛存在于土壤及水中与医院感染密切相关的革兰阴性杆菌尤其为免疫缺陷及肺囊性纤维化患者易感染细菌之一它可以在无糖的培养基中生长在医院环境中常可污染自来水体温表喷雾器静脉导管导尿管静脉输液
第七节 细胞培养污染的检验与去除一细菌与霉菌的污染由于环境条件差和操作不当等原因常可发生细菌和霉菌的污染常见污染的细菌有革兰阴性菌如:大肠埃希菌枯草杆菌假单胞菌等革兰阳性菌有葡萄球菌等真菌污染常可发生尤其炎热潮湿的季节十分常见如烟曲霉黑曲霉毛霉菌孢子苗等霉菌和细菌生长迅速能在短时间内抑制细胞生长或产生有意物质杀死细胞镜下可见脑浆内出现大量颗粒细胞变圆或崩溃从瓶壁脱落霉菌污染容易发现大多形成白色或浅
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