第四节 目的基因表达产物检测与分离纯化一、外源目的基因表达产物的检测 外源目的基因的表达包括转录和翻译两个阶段。外源基因表达产物的检测过程就是对特异性mRNA或蛋白质的检测。 特异性mRNA的检测: Northern杂交 特异性蛋白质的检测: ELISA, Western杂交 印迹杂交(Northern blot) 检测RNA(主要是mRNA)的方法 与Southern杂交的区别靶核酸:RNAR
24营养缺陷型选择标记:它与宿主的基因型有关911巴斯德毕赤酵母哺乳动物基因表达质粒载体是一类穿梭质粒能够在细菌(大肠杆菌)和哺乳动物细胞中进行扩增1719 哺乳动物基因表达宿主细胞选择的基本原则:来源丰富转化效率高表达效果好27COS细胞的特点:鼠骨髓瘤细胞如Sp20NSO和J558L等已被用作基因表达的受体细胞目前已有免疫球蛋白(Ig)tPA等多种外源基因在鼠骨髓瘤细胞中得到表达检测特异性蛋白
真核生物H2H2蛋白On不同基因种有不同的σ因子都可识别特征序列一致的启动子 σ因子的更换对细菌的时序调控非常重要标准(一致)序列—因为-10-35区(众多)启动子同源性极强称之相应的σ称之为标准σ为σ70终止机理DNA模板RNA pol 和新转录RNA组成三元复合体I结构基因Z-β半乳糖苷酶基因( β-galactosidase)Y-半乳糖苷透酶(乳糖透酶)( β-galotoside pori
原生质体培养技术植物
Click s控制区 信息区基因表达载体 原核生物多为单细胞异养生长快代谢易于控制可通过发酵迅速获得大量基因表达产物 基因组结构简单便于基因操作和分析 多数原核生物细胞内含有质粒或噬菌体便于构建相应的表达载体 生理代谢途径及基因表达调控机制比较清楚 不具备真核生物的蛋白质加工系统表达产物无特定的空间构象 内源蛋白酶会降解表达的外源蛋白造成表达产物的不稳定复制子:是一段包含
#
普通生物学CAI课件上 一 页下 一 页生命科学与理学院普通生物学课程组第六章 基因及其表达与调控一基因的本质 二DNA分子的结构 三DNA的复制 四RNA的结构与功能 五遗传信息的表达 六基因表达的调控 七基因突变与修复 八基因与人类疾病 普通生物学CAI课件上 一 页下 一 页生命科学与理学院普通生物学课程组本章目录总目录一基因的本质 普通生物学CAI课件上 一 页下 一 页生命科学与理学院
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级目的基因的表达与调控基因重组的主要目的是要使目的基因在某一细胞中能得到高效表达即产生人们所需要的高产的目的基因产物如蛋白质多肽类生物药物基因工程技术的核心是基因表达技术基因表达是指结构基因在调控序列的作用下转录成mRNA经加工后在核糖体的协助下又转译出相应的基因产物——蛋白质再在受体细胞环境中经修饰而显示出相应的功能从基因到有
Gene Expression Regulation 基因表达失控会导致严重后果影响蛋白质浓度的 七 个环节基因表达调控的一般原理DNA-Protein的相互作用模式原核生物基因的表达调控真核生物基因的表达调控四种转录起始调控的模式enhancercis element在DNA上trans acting factor为蛋白质(enhancer)典型的原核操纵子(operon)结构Enhancer和
单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级第三十九章 基因表达调控概述 (Introduction)基因表达(gene expression)--基因转录及翻译的过程rRNAtRNA的合成属于基因表达中心法则(the central dogma):一基因表达的时间性及适应性 (temporal and spatial specificity)1时间特异性(temp
违法有害信息,请在下方选择原因提交举报